Guia de centrífuga de placa PCR: preparação de placa de 96 e 384 poços

Uma centrífuga de placa PCR é usada para etapas curtas de rotação em fluxos de trabalho de PCR, qPCR e biologia molecular de alto rendimento. Para placas de 96 e 384 poços, o objetivo geralmente não é uma separação pesada, mas coletar gotículas das paredes do poço, reduzir bolhas e ajudar o líquido a assentar no fundo de cada poço antes do ciclo térmico, leitura, armazenamento ou manuseio a jusante.

GlanLab fornece opções de centrífuga de placas e centrífuga de microplacas para laboratórios que precisam de preparação confiável de placas. Ao selecionar um centrífuga de placa , os compradores devem verificar o formato da placa, método de vedação, método de equilíbrio, faixa de velocidade/RCF, recursos de segurança e rendimento diário em vez de escolher apenas pela velocidade.

 

Por que as placas PCR precisam de centrifugação

Coletando gotículas das paredes do poço

Após pipetar, selar ou misturar, pequenas gotas podem permanecer na parede lateral de cada poço ou na película de vedação. Uma centrífuga de placa PCR ajuda a mover essas gotículas para o fundo dos poços através de uma breve etapa de rotação, tornando a preparação da placa mais consistente antes do próximo processo.

Reduzindo bolhas antes de PCR ou qPCR

Bolhas podem aparecer após pipetagem, mistura ou selagem. Nos fluxos de trabalho de PCR e qPCR, eles podem afetar o posicionamento do líquido, a qualidade da vedação ou a leitura óptica. Uma curta etapa de centrifugação ajuda a reduzir problemas comuns de manuseio de líquidos, mas não deve ser descrita como uma garantia de melhores resultados de PCR.

Centrifugação curta após misturar ou selar

Muitos laboratórios realizam uma rotação curta após adicionar reagentes, misturar amostras ou aplicar filme de vedação. A velocidade e o tempo não devem ser copiados de protocolos online não relacionados. Os usuários devem seguir as instruções dos reagentes, as orientações do fabricante da placa, o manual da centrífuga e os POPs internos do laboratório.

 

Diferenças entre placas de 96 poços e 384 poços

Placas de 96 poços: comuns e mais fáceis de manusear

Uma placa de 96 poços é um dos formatos mais comuns em laboratórios de PCR e qPCR. Comparado com placas de 384 poços, geralmente possui maior volume de poço, espaço de pipetagem mais fácil e inspeção visual mais simples. Para muitos laboratórios de rotina, uma centrífuga de placas de 96 poços é suficiente para a preparação diária.

Placas de 384 poços: menor volume e maior sensibilidade de manuseio

Uma placa de 384 poços é frequentemente usada para fluxos de trabalho de maior produtividade. Como cada poço contém menor volume de líquido, gotículas, bolhas, qualidade de vedação e posicionamento da placa tornam-se mais importantes. Uma centrífuga que cabe em placas de 96 poços pode não caber automaticamente em placas de 384 poços.

O que os compradores devem verificar antes de escolher

Os compradores devem confirmar se a centrífuga suporta placas de 96 poços, placas de 384 poços, placas com rodapé, placas semi-com contorno, placas sem rodapé, tiras de tubos PCR e placas seladas. A direção do carregamento também é importante porque algumas centrífugas de microplacas utilizam carregamento vertical, enquanto outras utilizam estruturas de rotor diferentes.

 

Tira PCR, placas com e sem rodapé

Tiras PCR e microplacas de pequeno volume

Alguns laboratórios usam tubos de PCR de 0,2 ml, tiras de 8 tubos ou formatos de tiras de pequeno volume em vez de placas de PCR completas. Neste caso, os compradores devem verificar se a centrífuga de microplacas suporta tiras PCR diretamente ou requer adaptadores.

Placas PCR com contorno, semi-contorno e sem contorno

Placas com contorno, semi-contorno e sem contorno diferem na estrutura da estrutura e no suporte mecânico. Essas diferenças afetam o posicionamento da placa dentro da centrífuga, portanto, um ajuste seguro é mais importante do que uma afirmação geral de “compatibilidade da placa PCR”.

Adaptadores de placas e direção de carregamento

Podem ser necessários adaptadores para tipos específicos de placas ou tiras de PCR. A direção de carregamento também afeta a velocidade e a conveniência da operação. Uma centrífuga de placa PCR adequada deve corresponder ao formato real da placa usada no laboratório, e não apenas ao nome geral da categoria.

 

Centrifugação de rotação rápida versus centrifugação de separação

As centrífugas de placas PCR são principalmente para rotação rápida

Uma centrífuga de placas PCR é projetada principalmente para breve centrifugação de placas. Seu uso comum é coleta de gotículas, redução de bolhas e sedimentação de líquidos. É diferente de uma centrífuga usada para tubos de sangue, garrafas grandes ou separação de amostras pesadas.

Diferença das centrífugas de laboratório padrão

As centrífugas padrão podem ser projetadas para tubos, tubos cônicos, frascos, amostras de sangue ou recipientes de amostras maiores. Por outro lado, uma centrífuga de microplacas é projetada em torno do formato da placa e da conveniência de rotação curta. Compradores comparando os produtos de centrífuga de laboratório  devem separar as necessidades de preparação de placas das necessidades de separação de tubos.

Por que a velocidade não é o único fator

A velocidade é apenas uma especificação. Para a preparação da placa PCR, aceleração, frenagem, travamento da tampa, detecção de desequilíbrio, ajuste da placa, nível de ruído e pegada também são importantes. Um modelo compacto com compatibilidade correta de placas pode ser mais útil do que um modelo mais rápido que não cabe nas placas do laboratório.

 

Preocupações com o equilíbrio da placa e o filme de vedação

Por que o equilíbrio da placa é importante

As placas PCR devem ser carregadas simetricamente de acordo com o desenho da centrífuga. Se apenas uma placa for usada, algumas centrífugas poderão exigir uma placa de equilíbrio. Para orientação sobre como centrifugar placa de 96 poços , equilíbrio, vedação e método de carregamento devem ser verificados antes do uso de rotina.

Filme de vedação e preocupações com vazamento

Filme de vedação, filme adesivo, selos térmicos e tiras de tampa devem ser aplicados corretamente antes da centrifugação. A má vedação pode causar vazamento ou perda de amostra durante a centrifugação, portanto, os usuários devem verificar se a placa está vedada uniformemente e se encaixa na câmara sem obstrução.

Operação segura antes e depois da centrifugação

Uma boa centrífuga de placas PCR deve incluir controle seguro da tampa e operação estável. Recursos como trava da tampa, aviso de desequilíbrio e frenagem suave ajudam a reduzir o risco operacional. Os usuários não devem ignorar a proteção de segurança.

Tabela de seleção de centrífugas de microplacas

Tabela de compatibilidade de placas

Lista de verificação do comprador

Antes de fazer o pedido, confirme o formato da placa, tipo de placa, método de vedação, velocidade máxima/RCF, desempenho de aceleração e frenagem, método de equilíbrio, trava da tampa, detecção de desequilíbrio, nível de ruído, pegada, tensão, requisitos de plugue e suporte do fornecedor.

Direção final da investigação

Ao entrar em contato com um fornecedor, forneça o formato da placa, o tipo de placa, o método de vedação, a produtividade diária, o requisito esperado de centrifugação rápida, a voltagem e as limitações do espaço de trabalho. Você pode solicitar uma recomendação de centrífuga  do GlanLab com base nas necessidades de preparação da placa PCR.

 

Erros comuns de manuseio

Escolhendo uma centrífuga de tubo em vez de uma centrífuga de placa

Centrífugas de tubo e centrífugas de placa são projetadas para diferentes transportadores de amostras. Uma centrífuga de tubo geral não deve ser usada para placas PCR, a menos que um rotor de placa compatível seja claramente especificado.

Ignorando a compatibilidade de placas com 384 poços ou com rodapé

Alguns laboratórios começam com placas de 96 poços, mas depois passam para formatos de 384 poços ou com contorno. A escolha de um modelo com compatibilidade mais ampla pode reduzir futuras necessidades de substituição.

Usando valores de protocolo fixos de fontes não relacionadas

Os valores de velocidade e tempo devem vir de instruções de reagentes, orientações de placas, manuais de centrífugas e POPs de laboratório. As configurações de centrifugação PCR universal não devem ser copiadas sem verificação.

 

Conclusão

Uma centrífuga de placa PCR deve ser selecionada para compatibilidade da placa, desempenho de rotação rápida, método de equilíbrio, segurança de vedação e eficiência do fluxo de trabalho diário. Para preparação de placas de 96 e 384 poços, os compradores devem confirmar o formato da placa, tipo de placa, método de vedação, faixa de velocidade/RCF, recursos de segurança e rendimento antes de escolher um modelo.

GlanLab fornece soluções de centrífuga de placas e centrífuga de microplacas para laboratórios de PCR/qPCR, laboratórios de biologia molecular e fluxos de trabalho de preparação de amostras de alto rendimento. Os usuários podem compartilhar o formato da placa, método de vedação, tensão e requisitos diários de manuseio com o GlanLab para selecionar uma centrífuga adequada,Contate-nos.

 

Perguntas frequentes

Para que é usada uma centrífuga de placas PCR?

É usado principalmente para rotação rápida de placas de PCR, coletando gotículas das paredes dos poços, reduzindo bolhas e ajudando o líquido a assentar no fundo dos poços.

Uma centrífuga de placas PCR pode lidar com placas de 96 e 384 poços?

Alguns modelos suportam ambos os formatos, mas os compradores devem confirmar a compatibilidade com o tipo específico de placa, altura da placa e método de vedação.

Uma centrífuga de microplacas é igual a uma centrífuga padrão?

Não. Uma centrífuga de microplacas é projetada para formatos de placas, enquanto as centrífugas padrão geralmente são projetadas para tubos, frascos ou outros recipientes de amostras.

Preciso de uma centrífuga especial para placas PCR com contorno?

A centrífuga deve suportar claramente placas com rodapé, semi-revestimento ou sem rodapé. A folga e o suporte da estrutura devem ser verificados antes da compra.

Como devo escolher uma centrífuga de placa de 96 poços?

Verifique a compatibilidade da placa, faixa de velocidade/RCF, método de balanceamento, segurança de vedação, aceleração/frenagem, área ocupada, nível de ruído e suporte do fornecedor.