Separácia séra vs plazma: Aké nastavenia centrifúgy a typ rotora sú dôležité?

Sérum vs plazmová centrifúga  by sa mala vybrať podľa skúmavky s krvou, aditíva, konštrukcie rotora, požadovaného RCF a času a denného pracovného zaťaženia laboratória. Sérum aj plazma pochádzajú zo vzoriek krvi, ale podmienky pred centrifugáciou sú odlišné. Skúmavky so sérom normálne vyžadujú tvorbu zrazeniny, zatiaľ čo skúmavky s plazmou obsahujú antikoagulant, ktorý má zabrániť zrážaniu.

GlanLab odporúča pred výberom zariadenia skontrolovať celý pracovný postup prípravy vzorky. Vhodná centrifúga by mala podporovať presné skúmavky, adaptéry, požiadavky na separáciu a prevádzkové kontroly uvedené v SOP laboratória. Tento článok sa zameriava na konfiguráciu centrifúgy a separáciu vrstvy vzorky, nie na klinickú diagnostiku alebo univerzálny lekársky protokol.

1. Rozdiely v príprave vzoriek séra a plazmy

Vzorky séra vyžadujú štádium zrážania

Sérum sa pripravuje z krvi odobratej do obyčajnej skúmavky na sérum, skúmavky na aktiváciu zrazeniny alebo skúmavky na separáciu séra. Pred centrifugáciou zostáva vzorka normálne nerušená, kým sa nedosiahne zrážanlivosť špecifikovaná výrobcom skúmavky alebo laboratórnou SOP.

Z hľadiska zariadenia musí odstredivka prijať presnú skúmavku a poskytovať stabilnú silu, čas, zrýchlenie a brzdenie. Odstredenie pred dokončením požadovanej fázy prípravy vzorky môže znížiť jasnosť konečnej separácie.

Vzorky plazmy Použite antikoagulačné skúmavky

Plazma sa pripravuje z krvi odobratej do skúmavky obsahujúcej antikoagulant. Bežné systémy skúmaviek môžu používať aditíva na báze EDTA, heparínu alebo citrátu v závislosti od pracovného postupu laboratória.

Odstredivka neurčuje správnu prísadu. Jeho úlohou je spracovať vybranú rúru za podmienok uvedených v schválenom SOP. Laboratóriá porovnávajúce zariadenia môžu preskúmať špecializované krvnej centrifúge  po potvrdení ich typu vzorky a požiadaviek na skúmavku.

Konečné vrstvy nie sú identické

Po odstredení sa na skúmavkách so sérom zvyčajne nachádza vrstva kvapaliny nad zrazeninou alebo bariérou separátora. Plazmové skúmavky si zachovávajú antikoagulačnú tekutú vrstvu nad bunkovým materiálom.

Jasné oddelenie závisí od viac ako maximálnej rýchlosti. Príprava trubice, geometria rotora, RCF, čas a spomalenie ovplyvňujú, ako stabilné a viditeľné budú vrstvy po cykle.

2. Typ trubice a úvahy o prísadách

Identifikujte presnú krvnú skúmavku

Samotná farba skúmavky nestačí na výber centrifúgy. Laboratóriá by mali zaznamenať výrobcu, číslo produktu, nominálny objem, priemer, celkovú dĺžku, výšku uzáveru a tvar dna.

Dve skúmavky s rovnakým uvedeným objemom môžu potrebovať rôzne adaptéry. Jeden môže sedieť príliš vysoko v rotore, zatiaľ čo iný sa môže pohybovať vo vnútri príliš veľkého držiaka. Pred bežným používaním by sa mala potvrdiť správna podpora a vôľa veka.

Aditíva a separátory ovplyvňujú zhodu zariadení

Obyčajné skúmavky na sérum, skúmavky na aktiváciu zrazenín, skúmavky na separáciu gélu a skúmavky na antikoagulanciá sa môžu dodávať s rôznymi pokynmi na centrifugáciu. Gélové bariéry a mechanické separátory môžu mať tiež požiadavky na rotor alebo brzdenie.

Laboratórium by sa malo riadiť pokynmi pre skúmavku a jej overeným SOP, než aplikovať jedno nastavenie na každú skúmavku s krvou.

Adaptéry musia podporovať trubicu

Rúrka zapadajúca do otvoru rotora automaticky nepotvrdzuje kompatibilitu. Rúrka musí zostať podopretá počas zrýchľovania, prevádzky pri plnej rýchlosti a spomaľovania.

Potvrďte, či sú potrebné gumené vankúše, návleky, vedrá alebo špeciálne adaptéry. Výber adaptéra ovplyvňuje aj použiteľný počet trubíc na vyvážený chod.

 

3. Prečo typ rotora ovplyvňuje čistotu vrstvy

Výkyvné rotory vytvárajú horizontálnu polohu trubice

Výkyvný rotor umožňuje, aby sa lyžice pri zvyšovaní rýchlosti pohybovali smerom von. Počas behu sa krvné skúmavky priblížia do horizontálnej polohy. To môže vytvoriť plochejšie separačné rozhranie a uľahčiť pozorovanie hornej vrstvy séra alebo plazmy v mnohých bežných pracovných postupoch.

Výkyvný rotor však nie je potrebný pre každú skúmavku s krvou. Laboratórium by sa malo riadiť pokynmi výrobcu skúmaviek a schválenými SOP.

Rotory s pevným uhlom držia rúrky v konštantnom uhle

Rotor s pevným uhlom udržuje skúmavky naklonené počas odstreďovania. Oddelený materiál sleduje šikmú dráhu, takže konečné rozhranie sa môže javiť šikmejšie ako v horizontálnom vedre.

Niektoré krvné skúmavky umožňujú spracovanie s pevným uhlom, ale požadovaný čas alebo spôsob brzdenia sa môžu líšiť. The Pevný uhol vs. výklopné  vedenie rotora poskytuje širšie porovnanie geometrie rotora a bežných aplikácií.

Brzdenie môže ovplyvniť konečné rozhranie

Silné brzdenie rýchlo zastaví rotor a môže narušiť oddelené vrstvy alebo gélovú bariéru. Niektoré pracovné postupy umožňujú normálne brzdenie, zatiaľ čo iné vyžadujú znížené brzdenie alebo dlhší dojazd.

Brzda by sa nemala automaticky deaktivovať. Jeho nastavenie by sa malo riadiť pokynmi skúmavky a laboratórnym SOP.

 

4. RCF/čas by mal nasledovať laboratórny SOP

RCF je užitočnejšie ako samotné RPM

RPM popisuje rýchlosť rotora. RCF popisuje odstredivú silu generovanú pri uvedenom polomere rotora. Dve odstredivky pracujúce pri rovnakých otáčkach za minútu môžu na vzorku pôsobiť rôznymi silami.

Pri výmene zariadenia by laboratóriá mali zaznamenať existujúci typ rotora, polomer, RCF, čas a spôsob brzdenia. Prenos iba otáčok za minútu nemusí reprodukovať rovnaké prevádzkové podmienky.

GlanLab Sprievodca klinickými centrifúgami  ponúka ďalšie informácie o zhodných klinických vzorkách, skúmavkách, kapacite a konfiguráciách rotora.

Čas závisí od trubice a rotora

Čas odstreďovania vyvinutý pre výklopný rotor by sa nemal automaticky prenášať na rotor s pevným uhlom. Dizajn trubice, geometria rotora a cieľ separácie môžu ovplyvniť schválený čas chodu.

Z tohto dôvodu tento článok neposkytuje jedno pevné nastavenie séra alebo plazmy. Pokyny pre skúmavky, požiadavky na test a laboratórne SOP zostávajú konečnými referenciami.

Na zrýchlení a teplote môže tiež záležať

Niektoré pracovné postupy špecifikujú riadené zrýchlenie, spomalenie alebo teplotu. Odstredivka by mala poskytovať tieto kontroly, keď si ich laboratórny proces vyžaduje.

Chladenie by sa nemalo vyberať len preto, že vyzerá pokročilejšie. Laboratórium by malo potvrdiť, či je pre jeho vzorky a testovacie postupy potrebná kontrola teploty.

5. Kapacitné plánovanie pre denný pracovný tok

Vypočítajte použiteľné skúmavky na jeden cyklus

Maximálna kapacita rotora sa môže líšiť od praktickej kapacity. Rozmery rúrok, adaptéry, vyvažovacie polohy a zmiešané formáty rúr môžu znížiť počet spracovaných v jednom cykle.

Rotor propagovaný ako 24 pozícií nemusí obsahovať 24 skutočných laboratórnych skúmaviek krvi. Kapacita by mala byť potvrdená navrhovanou kombináciou trubice a adaptéra.

Plán pre dopyt v špičkovej hodine

Priemerný denný objem neukazuje, či odstredivka zvládne najrušnejšie obdobie. Laboratórium môže spracovať všetky vzorky do konca dňa, ale stále dochádza k oneskoreniu, keď sa niekoľko dávok dostane spolu.

Jednoduchý výpočet je:

Špičkové trubice za hodinu ÷ použiteľné trubice na jeden cyklus = minimálny počet cyklov počas najrušnejšej hodiny

Celkový čas cyklu by mal zahŕňať nakladanie, zrýchlenie, odstreďovanie, brzdenie, vykladanie a čistenie.

Zmiešané rúrky vyžadujú flexibilné plnenie

Laboratóriá spracovávajúce niekoľko veľkostí skúmaviek na sérum a plazmu môžu potrebovať vymeniteľné adaptéry alebo viac ako jednu sadu vedier. Personál by mal potvrdiť, či je možné v tom istom rotore bezpečne vyvážiť a spracovať rôzne formáty skúmaviek.

Väčší rotor je užitočný iba vtedy, keď sa zhoduje so skutočným mixom skúmaviek a umožňuje jednoduché nakladanie.

 

6. Ako diskutovať o požiadavkách s dodávateľom

Pred vyžiadaním zariadenia si pripravte hlavnú vzorku a prevádzkové informácie v jednej tabuľke.

Pri výmene existujúcej odstredivky uveďte aktuálny model a podrobnosti o rotore. To umožňuje dodávateľovi porovnať starú a navrhovanú konfiguráciu, a nie odporúčať stroj iba na základe rýchlosti a kapacity.

Ak je kompatibilita neistá, laboratóriá môžu poslať výkresy skúmaviek, fotografie alebo fyzické vzorky. Pred objednávkou sa odporúča písomné potvrdenie kombinácie odstredivky, rotora, vedra a adaptéra.

 

Záver

Výber séra a plazmovej centrifúgy vyžaduje viac než len porovnávanie otáčok za minútu alebo maximálnej kapacity skúmavky. Konštrukcia krvnej skúmavky, pracovný tok zrážania alebo antikoagulancia, poloha rotora, RCF, čas, brzdenie, priehľadnosť vrstvy a denná kapacita sa musia posudzovať spoločne.

GlanLab odporúča pred dokončením konfigurácie centrifúgy postupovať podľa schválených laboratórnych SOP a pokynov výrobcu skúmaviek s krvou. Ak chcete prediskutovať pracovný postup séra alebo plazmy, kontaktujte nás  so špecifikáciami trubice, preferenciou rotora, požadovaným RCF a časom, denným objemom a miestnym napätím.

 

FAQ

Je sérum centrifugované pred alebo po zrážaní?

Skúmavky so sérom sa normálne centrifugujú po stave zrážania, ktorý je uvedený v pokynoch pre skúmavky alebo v laboratórnych SOP.

Vyžaduje plazma antikoagulačnú skúmavku?

áno. Príprava plazmy využíva antikoagulačnú skúmavku špecifikovanú laboratórnym pracovným postupom.

Je vždy potrebný výklopný rotor?

Nie. Výber rotora by sa mal riadiť pokynmi pre skúmavku krvi a schválenými SOP.

Môžu sérum a plazma používať rovnakú odstredivku?

Áno, keď ovládania rúrok, rotora, RCF, času a brzdenia podporujú oba pracovné postupy.

Malo by laboratórium používať RPM alebo RCF?

RCF je užitočnejšie na porovnávanie rôznych veľkostí rotorov, ale laboratórna SOP zostáva konečnou referenciou.