Separace séra vs plazma: Na jakých nastaveních centrifugy a typu rotoru záleží?

Sérová vs. plazmová centrifuga  by měla být vybrána podle zkumavky s krví, aditiva, konstrukce rotoru, požadovaného RCF a času a denního pracovního zatížení laboratoře. Sérum i plazma pocházejí ze vzorků krve, ale podmínky před centrifugací jsou odlišné. Zkumavky se sérem normálně vyžadují tvorbu sraženiny, zatímco zkumavky s plazmou obsahují antikoagulant, který má zabránit srážení.

GlanLab doporučuje před výběrem zařízení zkontrolovat celý pracovní postup přípravy vzorků. Vhodná centrifuga by měla podporovat přesné zkumavky, adaptéry, požadavky na separaci a provozní kontroly uvedené v SOP laboratoře. Tento článek se zaměřuje na konfiguraci centrifugy a separaci vrstvy vzorku, nikoli na klinickou diagnózu nebo univerzální lékařský protokol.

1. Rozdíly v přípravě vzorků séra a plazmy

Vzorky séra vyžadují fázi srážení

Sérum se připravuje z krve odebrané do obyčejné zkumavky na sérum, zkumavky s aktivátorem sraženiny nebo zkumavky se separátorem séra. Před centrifugací zůstává vzorek normálně nerušený, dokud není dosaženo srážecích podmínek specifikovaných výrobcem zkumavek nebo laboratorních SOP.

Z hlediska zařízení musí centrifuga přijmout přesnou trubici a poskytovat stabilní sílu, čas, zrychlení a brzdění. Centrifugace před dokončením požadované fáze přípravy vzorku může snížit jasnost konečné separace.

Vzorky plazmy Použijte antikoagulační zkumavky

Plazma se připravuje z krve odebrané do zkumavky obsahující antikoagulant. Běžné systémy zkumavek mohou používat přísady na bázi EDTA, heparinu nebo citrátu v závislosti na pracovním postupu laboratoře.

Odstředivka neurčuje správné aditivum. Jeho úlohou je zpracovat vybranou trubku za podmínek uvedených ve schváleném SOP. Laboratoře porovnávající zařízení mohou přezkoumat specializované krevní centrifugu  po potvrzení jejich typu vzorku a požadavků na zkumavku.

Konečné vrstvy nejsou totožné

Po odstředění se na zkumavkách se sérem normálně objeví vrstva kapaliny nad sraženinou nebo bariérou separátoru. Plazmové zkumavky udržují nad buněčným materiálem antikoagulovanou tekutou vrstvu.

Jasné oddělení závisí na více než maximální rychlosti. Příprava trubky, geometrie rotoru, RCF, čas a zpomalení ovlivňují, jak stabilní a viditelné vrstvy po běhu vypadají.

2. Typ trubky a úvahy o přísadách

Identifikujte přesnou krevní zkumavku

Samotná barva zkumavky pro výběr centrifugy nestačí. Laboratoře by měly zaznamenat výrobce, číslo produktu, jmenovitý objem, průměr, celkovou délku, výšku uzávěru a tvar dna.

Dvě zkumavky se stejným uvedeným objemem mohou vyžadovat různé adaptéry. Jeden může sedět v rotoru příliš vysoko, zatímco jiný se může pohybovat uvnitř příliš velkého držáku. Před běžným použitím by měla být potvrzena správná podpora a vůle víka.

Aditiva a separátory ovlivňují přizpůsobení zařízení

Obyčejné zkumavky na sérum, zkumavky s aktivátorem sraženiny, zkumavky s gelovým separátorem a zkumavky s antikoagulanty mohou být dodávány s různými pokyny pro centrifugaci. Gelové bariéry a mechanické separátory mohou mít také požadavky na rotor nebo brzdění.

Laboratoř by se měla řídit pokyny pro zkumavku a jejím ověřeným SOP, spíše než aplikovat jedno nastavení na každou zkumavku s krví.

Adaptéry musí podporovat trubici

Zasunutí trubky do otvoru rotoru automaticky nepotvrzuje kompatibilitu. Trubice musí zůstat podepřená během zrychlování, provozu při plné rychlosti a zpomalování.

Potvrďte, zda jsou vyžadovány pryžové polštáře, rukávy, kbelíky nebo vyhrazené adaptéry. Výběr adaptéru také ovlivňuje použitelný počet trubic na vyvážený běh.

 

3. Proč typ rotoru ovlivňuje čistotu vrstvy

Výkyvné rotory vytvářejí horizontální polohu trubky

Výkyvný rotor umožňuje, aby se lopaty pohybovaly směrem ven se zvyšující se rychlostí. Během běhu se zkumavky s krví přiblíží do vodorovné polohy. To může vytvořit plošší separační rozhraní a usnadnit pozorování horní vrstvy séra nebo plazmy v mnoha rutinních pracovních postupech.

Výkyvný rotor však není vyžadován pro každou zkumavku s krví. Laboratoř by se měla řídit pokyny výrobce zkumavek a schválenými SOP.

Rotory s pevným úhlem drží trubky v konstantním úhlu

Rotor s pevným úhlem udržuje zkumavky nakloněné po celou dobu odstřeďování. Oddělený materiál sleduje šikmou dráhu, takže konečné rozhraní se může jevit více nakloněné než ve vodorovné lopatě.

Některé krevní zkumavky umožňují zpracování v pevném úhlu, ale požadovaný čas nebo způsob brzdění se mohou lišit. The vedení s pevným úhlem vs. vyklápěcí  vedení rotoru poskytuje širší srovnání geometrie rotoru a rutinních aplikací.

Brzdění může ovlivnit konečné rozhraní

Silné brzdění rychle zastaví rotor a může narušit oddělené vrstvy nebo gelovou bariéru. Některé pracovní postupy umožňují normální brzdění, zatímco jiné vyžadují snížené brzdění nebo delší dojezd.

Brzda by se neměla automaticky deaktivovat. Jeho nastavení by se mělo řídit pokyny zkumavky a laboratorním SOP.

 

4. RCF/čas by měl následovat laboratorní SOP

RCF je užitečnější než samotné RPM

RPM popisuje rychlost rotoru. RCF popisuje odstředivou sílu generovanou při uvedeném poloměru rotoru. Dvě odstředivky pracující při stejných otáčkách za minutu mohou na vzorek působit různými silami.

Při výměně zařízení by laboratoře měly zaznamenat stávající typ rotoru, poloměr, RCF, čas a způsob brzdění. Přenos pouze otáček za minutu nemusí reprodukovat stejné provozní podmínky.

GlanLab průvodce klinickou centrifugou  nabízí další informace o přizpůsobení klinických vzorků, zkumavek, kapacitě a konfiguracích rotoru.

Čas závisí na trubce a rotoru

Doba odstřeďování vyvinutá pro výkyvný rotor by se neměla automaticky přenášet na rotor s pevným úhlem. Návrh trubky, geometrie rotoru a cíl separace mohou ovlivnit schválenou dobu provozu.

Z tohoto důvodu tento článek neposkytuje jedno pevné nastavení séra nebo plazmy. Pokyny pro zkumavky, požadavky na test a laboratorní SOP zůstávají konečnými referencemi.

Na zrychlení a teplotě může také záležet

Některé pracovní postupy specifikují řízené zrychlení, zpomalení nebo teplotu. Tyto kontroly by měla poskytovat centrifuga, pokud je laboratorní proces vyžaduje.

Chlazení by nemělo být zvoleno pouze proto, že se zdá pokročilejší. Laboratoř by měla potvrdit, zda je u jejích vzorků a testovacích postupů nezbytná kontrola teploty.

5. Plánování kapacity pro denní pracovní tok

Vypočítejte použitelné zkumavky na běh

Maximální kapacita rotoru se může lišit od praktické kapacity. Rozměry trubek, adaptéry, vyvažovací polohy a smíšené formáty trubek mohou snížit počet zpracovaných v jednom cyklu.

Rotor inzerovaný jako 24 pozic nemusí pojmout 24 skutečných laboratorních krevních zkumavek. Kapacita by měla být potvrzena navrženou kombinací trubice a adaptéru.

Plán pro poptávku ve špičce

Průměrný denní objem neukazuje, zda centrifuga zvládne nejrušnější období. Laboratoř může zpracovat všechny vzorky do konce dne, ale stále dochází ke zpožděním, když dorazí několik šarží společně.

Jednoduchý výpočet je:

Špičkové zkumavky za hodinu ÷ využitelné zkumavky na běh = minimální počet cyklů během nejrušnější hodiny

Celková doba cyklu by měla zahrnovat nakládání, zrychlování, odstřeďování, brzdění, vykládání a čištění.

Smíšené trubky vyžadují flexibilní plnění

Laboratoře zpracovávající několik velikostí zkumavek se sérem a plazmou mohou potřebovat vyměnitelné adaptéry nebo více než jednu sadu kbelíků. Zaměstnanci by měli potvrdit, zda lze různé formáty zkumavek vyvážit a bezpečně zpracovat ve stejném rotoru.

Větší rotor je užitečný pouze tehdy, když odpovídá skutečné směsi trubek a umožňuje snadné nakládání.

 

6. Jak projednat požadavky s dodavatelem

Před vyžádáním vybavení si připravte hlavní vzorek a provozní informace v jedné tabulce.

Při výměně stávající odstředivky uveďte aktuální model a podrobnosti o rotoru. To umožňuje dodavateli porovnat starou a navrhovanou konfiguraci spíše než doporučovat stroj pouze na základě rychlosti a kapacity.

Tam, kde je kompatibilita nejistá, mohou laboratoře zaslat nákresy zkumavek, fotografie nebo fyzické vzorky. Před objednáním je vhodné písemné potvrzení kombinace odstředivky, rotoru, kbelíku a adaptéru.

 

Závěr

Výběr sérové ​​a plazmové centrifugy vyžaduje více než porovnávání otáček za minutu nebo maximální kapacity zkumavky. Návrh krevní trubice, pracovní tok srážení nebo antikoagulancia, poloha rotoru, RCF, čas, brzdění, čistota vrstvy a denní průchodnost musí být zváženy společně.

GlanLab doporučuje před dokončením konfigurace centrifugy dodržovat schválené laboratorní SOP a pokyny výrobce zkumavek s krví. Chcete-li prodiskutovat pracovní postup séra nebo plazmy, kontaktujte nás  s údaji o specifikaci trubice, preferenci rotoru, požadovaném RCF a čase, denním objemu a místním napětí.

 

FAQ

Je sérum centrifugováno před nebo po srážení?

Zkumavky se sérem se normálně odstřeďují po srážení uvedeném v pokynech pro zkumavky nebo laboratorní SOP.

Vyžaduje plazma antikoagulační zkumavku?

Ano. K přípravě plazmy se používá antikoagulační zkumavka specifikovaná laboratorním pracovním postupem.

Je vždy nutný výkyvný rotor?

Ne. Výběr rotoru by se měl řídit pokyny zkumavky a schválenými SOP.

Mohou sérum a plazma používat stejnou centrifugu?

Ano, když trubky, rotor, RCF, čas a ovládání brzd podporují oba pracovní postupy.

Měla by laboratoř používat RPM nebo RCF?

RCF je užitečnější pro porovnávání různých velikostí rotorů, ale laboratorní SOP zůstává konečnou referencí.