Separação de soro versus plasma: quais configurações de centrífuga e tipo de rotor são importantes?

Uma centrífuga de soro versus plasma  deve ser selecionada de acordo com o tubo de sangue, o aditivo, o design do rotor, o RCF e o tempo necessários e a carga de trabalho diária do laboratório. O soro e o plasma provêm de amostras de sangue, mas as condições antes da centrifugação são diferentes. Os tubos de soro normalmente requerem a formação de coágulos, enquanto os tubos de plasma contêm um anticoagulante destinado a prevenir a coagulação.

A GlanLab recomenda verificar todo o fluxo de trabalho de preparação de amostras antes de selecionar o equipamento. Uma centrífuga adequada deve suportar exatamente os tubos, adaptadores, requisitos de separação e controles operacionais listados no POP do laboratório. Este artigo se concentra na configuração da centrífuga e na separação da camada de amostra, não no diagnóstico clínico ou em um protocolo médico universal.

1. Diferenças na preparação de amostras de soro e plasma

Amostras de soro requerem um estágio de coagulação

O soro é preparado a partir de sangue coletado em um tubo de soro simples, tubo ativador de coágulo ou tubo separador de soro. Antes da centrifugação, a amostra normalmente permanece intacta até que a condição de coagulação especificada pelo fabricante do tubo ou pelo SOP do laboratório seja alcançada.

Do ponto de vista do equipamento, a centrífuga deve aceitar o tubo exato e fornecer força, tempo, aceleração e frenagem estáveis. A centrifugação antes da conclusão da etapa necessária de preparação da amostra pode reduzir a clareza da separação final.

Amostras de plasma usam tubos anticoagulantes

O plasma é preparado a partir de sangue coletado em um tubo contendo um anticoagulante. Os sistemas de tubos comuns podem usar aditivos à base de EDTA, heparina ou citrato, dependendo do fluxo de trabalho do laboratório.

A centrífuga não determina o aditivo correto. Sua função é processar o tubo selecionado nas condições indicadas no POP aprovado. Os laboratórios que comparam equipamentos podem analisar um centrífuga de sangue  após confirmar o tipo de amostra e os requisitos do tubo.

As camadas finais não são idênticas

Após a centrifugação, os tubos de soro normalmente apresentam uma camada líquida acima do coágulo ou da barreira separadora. Os tubos de plasma retêm uma camada líquida anticoagulada acima do material celular.

A separação clara depende de mais do que a velocidade máxima. A preparação do tubo, a geometria do rotor, o RCF, o tempo e a desaceleração influenciam a estabilidade e a visibilidade das camadas após a execução.

2. Tipo de tubo e considerações sobre aditivos

Identifique o tubo de sangue exato

A cor do tubo por si só não é suficiente para a seleção da centrífuga. Os laboratórios devem registrar o fabricante, número do produto, volume nominal, diâmetro, comprimento total, altura da tampa e formato do fundo.

Dois tubos com o mesmo volume declarado podem necessitar de adaptadores diferentes. Um pode ficar muito alto no rotor, enquanto outro pode se mover dentro de um suporte superdimensionado. O suporte adequado e a folga da tampa devem ser confirmados antes do uso rotineiro.

Aditivos e Separadores Afetam a Combinação de Equipamentos

Tubos de soro simples, tubos de ativador de coágulo, tubos separadores de gel e tubos de anticoagulante podem vir com instruções de centrifugação diferentes. Barreiras de gel e separadores mecânicos também podem ter requisitos de rotor ou frenagem.

O laboratório deve seguir as instruções do tubo e o seu POP validado em vez de aplicar uma configuração a cada tubo de sangue.

Os adaptadores devem suportar o tubo

Um tubo encaixado na abertura do rotor não confirma automaticamente a compatibilidade. O tubo deve permanecer apoiado durante a aceleração, operação em velocidade máxima e desaceleração.

Confirme se são necessárias almofadas de borracha, mangas, baldes ou adaptadores dedicados. A seleção do adaptador também afeta o número utilizável de tubos por corrida balanceada.

 

3. Por que o tipo de rotor afeta a clareza da camada

Rotores oscilantes produzem uma posição horizontal do tubo

Um rotor oscilante permite que as caçambas se movam para fora à medida que a velocidade aumenta. Durante a corrida, os tubos de sangue aproximam-se da posição horizontal. Isto pode criar uma interface de separação mais plana e tornar a camada superior de soro ou plasma mais fácil de observar em muitos fluxos de trabalho de rotina.

No entanto, não é necessário um rotor oscilante para todos os tubos de sangue. O laboratório deve seguir as instruções do fabricante do tubo e o POP aprovado.

Rotores de ângulo fixo mantêm os tubos em um ângulo constante

Um rotor de ângulo fixo mantém os tubos inclinados durante a centrifugação. O material separado segue um caminho inclinado, de modo que a interface final pode parecer mais inclinada do que em uma caçamba horizontal.

Alguns tubos de sangue permitem processamento em ângulo fixo, mas o tempo necessário ou o método de frenagem podem ser diferentes. O guia de rotor de ângulo fixo versus guia de rotor oscilante  fornece uma comparação mais ampla da geometria do rotor e aplicações de rotina.

A frenagem pode afetar a interface final

Uma frenagem forte para o rotor rapidamente e pode perturbar as camadas separadas ou uma barreira de gel. Alguns fluxos de trabalho permitem a frenagem normal, enquanto outros exigem uma frenagem reduzida ou uma desaceleração mais longa.

O freio não deve ser desativado automaticamente. Sua configuração deve seguir as instruções do tubo de sangue e o POP do laboratório.

 

4. RCF/tempo deve seguir o SOP do laboratório

RCF é mais útil do que apenas RPM

RPM descreve a velocidade do rotor. RCF descreve a força centrífuga gerada em um raio de rotor determinado. Duas centrífugas operando na mesma RPM podem aplicar forças diferentes à amostra.

Ao substituir equipamentos, os laboratórios devem registrar o tipo de rotor existente, raio, RCF, tempo e método de frenagem. Transferir apenas o RPM pode não reproduzir as mesmas condições de operação.

O GlanLab O guia da centrífuga clínica  oferece informações adicionais sobre a correspondência de amostras clínicas, tubos, capacidade e configurações do rotor.

O tempo depende do tubo e do rotor

Um tempo de centrifugação desenvolvido para um rotor oscilante não deve ser transferido automaticamente para um rotor de ângulo fixo. O projeto do tubo, a geometria do rotor e a meta de separação podem afetar o tempo de operação aprovado.

Por esse motivo, este artigo não fornece uma configuração fixa de soro ou plasma. As instruções do tubo, os requisitos do ensaio e os POP laboratoriais permanecem como referências finais.

Aceleração e temperatura também podem ser importantes

Alguns fluxos de trabalho especificam aceleração, desaceleração ou temperatura controladas. Uma centrífuga deve fornecer esses controles quando forem exigidos pelo processo laboratorial.

A refrigeração não deve ser selecionada apenas porque parece mais avançada. O laboratório deve confirmar se o controle de temperatura é necessário para suas amostras e procedimentos de teste.

5. Planejamento de capacidade para fluxo de trabalho diário

Calcular tubos utilizáveis ​​por corrida

A capacidade máxima do rotor pode diferir da capacidade prática. Dimensões de tubos, adaptadores, posições de balanceamento e formatos mistos de tubos podem reduzir o número processado em um ciclo.

Um rotor anunciado como tendo 24 posições pode não conter 24 tubos de sangue reais do laboratório. A capacidade deve ser confirmada com a combinação proposta de tubo e adaptador.

Planeje a demanda no horário de pico

O volume diário médio não mostra se a centrífuga consegue lidar com o período de maior movimento. Um laboratório pode processar todas as amostras até o final do dia, mas ainda assim sofrer atrasos quando vários lotes chegam juntos.

Um cálculo simples é:

Pico de tubos por hora ÷ tubos utilizáveis ​​por execução = ciclos mínimos durante a hora de maior movimento

O tempo total do ciclo deve incluir carga, aceleração, centrifugação, frenagem, descarga e limpeza.

Tubos mistos precisam de carregamento flexível

Laboratórios que processam diversos tamanhos de tubos de soro e plasma podem precisar de adaptadores intercambiáveis ​​ou mais de um conjunto de baldes. A equipe deve confirmar se diferentes formatos de tubos podem ser balanceados e processados ​​com segurança no mesmo rotor.

Um rotor maior é útil apenas quando corresponde à mistura de tubos real e mantém o carregamento direto.

 

6. Como discutir requisitos com o fornecedor

Antes de solicitar equipamentos, prepare as principais amostras e informações operacionais em uma única tabela.

Ao substituir uma centrífuga existente, forneça o modelo atual e os detalhes do rotor. Isso permite que o fornecedor compare as configurações antigas e propostas, em vez de recomendar uma máquina apenas com base na velocidade e na capacidade.

Quando a compatibilidade for incerta, os laboratórios podem enviar desenhos de tubos, fotografias ou amostras físicas. A confirmação por escrito da combinação de centrífuga, rotor, balde e adaptador é preferível antes do pedido.

 

Conclusão

Selecionar uma centrífuga de soro versus plasma requer mais do que comparar RPM ou capacidade máxima do tubo. O design do tubo sanguíneo, o fluxo de trabalho de coagulação ou anticoagulante, a posição do rotor, RCF, tempo, frenagem, clareza da camada e rendimento diário devem ser considerados em conjunto.

A GlanLab recomenda seguir o POP aprovado do laboratório e as instruções do fabricante do tubo de sangue antes de finalizar a configuração da centrífuga. Para discutir seu fluxo de trabalho de soro ou plasma, entre em contato conosco  com as especificações do tubo, preferência do rotor, RCF e tempo necessários, volume diário e tensão local.

 

Perguntas frequentes

O soro é centrifugado antes ou depois da coagulação?

Os tubos de soro são normalmente centrifugados após a condição de coagulação indicada nas instruções do tubo ou no POP do laboratório.

O plasma requer um tubo anticoagulante?

Sim. A preparação de plasma utiliza o tubo anticoagulante especificado pelo fluxo de trabalho do laboratório.

Um rotor oscilante é sempre necessário?

Não. A seleção do rotor deve seguir as instruções do tubo de sangue e o POP aprovado.

O soro e o plasma podem usar a mesma centrífuga?

Sim, quando os controles de tubos, rotor, RCF, tempo e frenagem suportam ambos os fluxos de trabalho.

Um laboratório deve usar RPM ou RCF?

O RCF é mais útil para comparar diferentes tamanhos de rotores, mas o SOP de laboratório continua sendo a referência final.