Separacja surowicy a osocza: jakie ustawienia wirówki i typ rotora mają znaczenie?

Wirówkę do surowicy lub osocza  należy wybrać w zależności od probówki na krew, dodatku, konstrukcji rotora, wymaganego RCF i czasu oraz dziennego obciążenia laboratorium. Zarówno surowica, jak i osocze pochodzą z próbek krwi, ale warunki przed wirowaniem są inne. Probówki z surowicą zwykle wymagają utworzenia skrzepu, podczas gdy probówki z osoczem zawierają antykoagulant mający na celu zapobieganie krzepnięciu.

GlanLab zaleca sprawdzenie całego procesu przygotowania próbki przed wyborem sprzętu. Odpowiednia wirówka powinna obsługiwać dokładnie takie probówki, adaptery, wymagania dotyczące separacji i elementy sterujące wymienione w laboratoryjnej procedurze SOP. W tym artykule skupiono się na konfiguracji wirówki i separacji warstw próbek, a nie na diagnostyce klinicznej czy uniwersalnym protokole medycznym.

1. Różnice w przygotowaniu próbek surowicy i osocza

Próbki surowicy wymagają etapu krzepnięcia

Surowicę przygotowuje się z krwi zebranej w zwykłej probówce na surowicę, probówce z aktywatorem skrzepu lub probówce oddzielającej surowicę. Przed odwirowaniem próbka zwykle pozostaje nienaruszona aż do osiągnięcia warunków krzepnięcia określonych przez producenta probówki lub SOP laboratorium.

Z punktu widzenia sprzętu wirówka musi przyjmować dokładnie taką rurę i zapewniać stabilną siłę, czas, przyspieszenie i hamowanie. Wirowanie przed zakończeniem wymaganego etapu przygotowania próbki może zmniejszyć klarowność końcowego rozdziału.

Do próbek osocza należy używać probówek z antykoagulantem

Osocze przygotowuje się z krwi pobranej do probówki zawierającej antykoagulant. W typowych systemach probówek można stosować dodatki na bazie EDTA, heparyny lub cytrynianu, w zależności od przepływu pracy w laboratorium.

Wirówka nie określa prawidłowego dodatku. Jego rolą jest obróbka wybranej rury zgodnie z warunkami określonymi w zatwierdzonej SOP. Laboratoria porównujące sprzęt mogą dokonać przeglądu dedykowanego wirówce krwi  po potwierdzeniu rodzaju próbki i wymagań dotyczących probówki.

Warstwy końcowe nie są identyczne

Po odwirowaniu w probówkach z surowicą zwykle widoczna jest warstwa cieczy powyżej skrzepu lub bariery separatora. Rurki plazmowe zatrzymują antykoagulowaną warstwę cieczy nad materiałem komórkowym.

Wyraźna separacja zależy od prędkości większej niż maksymalna. Przygotowanie rurki, geometria wirnika, RCF, czas i opóźnienie wpływają na to, jak stabilne i widoczne są warstwy po cyklu.

2. Typ rurki i kwestie dotyczące dodatków

Zidentyfikuj dokładną probówkę z krwią

Sam kolor probówki nie wystarczy do doboru wirówki. Laboratoria powinny odnotować producenta, numer produktu, objętość nominalną, średnicę, długość całkowitą, wysokość nasadki i kształt dna.

Dwie probówki o tej samej podanej objętości mogą wymagać różnych adapterów. Jeden może znajdować się zbyt wysoko w rotorze, a drugi może poruszać się w zbyt dużym uchwycie. Przed rutynowym użyciem należy sprawdzić prawidłowe podparcie i prześwit pokrywy.

Dodatki i separatory wpływają na dopasowanie sprzętu

Do zwykłych probówek na surowicę, probówek z aktywatorem skrzepu, probówek do oddzielania żelu i probówek z antykoagulantem mogą być dołączone inne instrukcje wirowania. Bariery żelowe i separatory mechaniczne mogą również mieć wymagania dotyczące wirnika lub hamowania.

Laboratorium powinno postępować zgodnie z instrukcjami dotyczącymi probówek i zatwierdzonymi procedurami operacyjnymi, zamiast stosować jedno ustawienie do każdej probówki z krwią.

Adaptery muszą obsługiwać rurkę

Dopasowanie rurki do otworu rotora nie potwierdza automatycznie zgodności. Rura musi pozostać podparta podczas przyspieszania, pracy z pełną prędkością i zwalniania.

Sprawdź, czy wymagane są gumowe poduszki, rękawy, wiadra lub dedykowane adaptery. Wybór adaptera wpływa również na użyteczną liczbę lamp na cykl zrównoważony.

 

3. Dlaczego typ rotora wpływa na przejrzystość warstwy

Odchylane rotory zapewniają poziomą pozycję rury

Odchylany rotor umożliwia wysuwanie łyżek na zewnątrz wraz ze wzrostem prędkości. Podczas biegu rurki z krwią zbliżają się do pozycji poziomej. Może to stworzyć bardziej płaski interfejs separacji i ułatwić obserwację górnej warstwy surowicy lub osocza w wielu rutynowych przepływach pracy.

Jednakże wychylny rotor nie jest wymagany w przypadku każdej probówki z krwią. Laboratorium powinno postępować zgodnie z instrukcjami producenta probówki i zatwierdzonymi SOP.

Rotory o stałym kącie utrzymują rury pod stałym kątem

Wirnik o stałym kącie utrzymuje probówki w pozycji pochylonej podczas wirowania. Oddzielony materiał podąża ścieżką pod kątem, więc końcowy interfejs może wydawać się bardziej nachylony niż w poziomym wiadrze.

Niektóre probówki umożliwiają obróbkę pod stałym kątem, ale wymagany czas lub metoda hamowania mogą się różnić. The Prowadnica rotora o stałym kącie i odchylana  zapewnia szersze porównanie geometrii rotora i rutynowych zastosowań.

Hamowanie może mieć wpływ na końcowy interfejs

Silne hamowanie szybko zatrzymuje wirnik i może naruszyć oddzielone warstwy lub barierę żelową. Niektóre procesy robocze pozwalają na normalne hamowanie, podczas gdy inne wymagają zmniejszonego hamowania lub dłuższej jazdy wybiegiem.

Hamulec nie powinien wyłączać się automatycznie. Jego ustawienie powinno być zgodne z instrukcją probówki i SOP laboratorium.

 

4. RCF/czas powinien być zgodny z procedurą laboratoryjną

RCF jest bardziej przydatny niż sam RPM

RPM opisuje prędkość wirnika. RCF opisuje siłę odśrodkową wytwarzaną przy określonym promieniu wirnika. Dwie wirówki pracujące przy tych samych obrotach mogą przykładać do próbki różne siły.

Podczas wymiany sprzętu laboratoria powinny zarejestrować istniejący typ wirnika, promień, RCF, czas i metodę hamowania. Przeniesienie tylko obrotów może nie odtworzyć tych samych warunków pracy.

GlanLab przewodnik po wirówce klinicznej  zawiera dodatkowe informacje na temat dopasowywania próbek klinicznych, probówek, pojemności i konfiguracji rotora.

Czas zależy od rury i rotora

Czas wirowania ustalony dla rotora wychylanego nie powinien być automatycznie przenoszony na rotor o stałym kącie. Konstrukcja rury, geometria wirnika i cel separacji mogą mieć wpływ na zatwierdzony czas pracy.

Z tego powodu w tym artykule nie podano jednego stałego ustawienia surowicy lub osocza. Instrukcje dotyczące probówek, wymagania dotyczące testów i laboratoryjne SOP pozostają ostatecznymi odniesieniami.

Przyspieszenie i temperatura mogą również mieć znaczenie

Niektóre procesy robocze określają kontrolowane przyspieszanie, zwalnianie lub temperaturę. Wirówka powinna zapewniać te kontrole, gdy są one wymagane w procesie laboratoryjnym.

Nie należy wybierać chłodzenia tylko dlatego, że wydaje się bardziej zaawansowane. Laboratorium powinno potwierdzić, czy konieczna jest kontrola temperatury jego próbek i procedur badawczych.

5. Planowanie wydajności w codziennym przepływie pracy

Oblicz liczbę użytecznych rur na przebieg

Maksymalna pojemność rotora może różnić się od wydajności praktycznej. Wymiary rur, adaptery, pozycje wyważenia i mieszane formaty rur mogą zmniejszyć liczbę przetwarzanych w jednym cyklu.

Wirnik reklamowany jako posiadający 24 pozycje może nie pomieścić 24 probówek z krwią dostępnych w laboratorium. Pojemność należy potwierdzić proponowaną kombinacją tuby i adaptera.

Planuj zapotrzebowanie w godzinach szczytu

Średnia dzienna objętość nie pokazuje, czy wirówka wytrzyma najbardziej pracowity okres. Laboratorium może przetworzyć wszystkie próbki do końca dnia, ale nadal występują opóźnienia, gdy kilka partii dociera razem.

Prosta kalkulacja jest następująca:

Szczytowa liczba rur na godzinę ÷ liczba użytecznych rur na przebieg = minimalna liczba cykli w godzinach największego ruchu

Całkowity czas cyklu powinien obejmować ładowanie, przyspieszanie, wirowanie, hamowanie, rozładunek i czyszczenie.

Rury mieszane wymagają elastycznego ładowania

Laboratoria przetwarzające probówki o różnych rozmiarach na surowicę i osocze mogą potrzebować wymiennych adapterów lub więcej niż jednego zestawu wiader. Personel powinien potwierdzić, czy różne formaty probówek można wyważać i bezpiecznie przetwarzać w tym samym rotorze.

Większy rotor jest użyteczny tylko wtedy, gdy pasuje do rzeczywistego miksu probówek i zapewnia proste ładowanie.

 

6. Jak omówić wymagania z dostawcą

Przed zamówieniem sprzętu przygotuj główną próbkę i informacje operacyjne w jednej tabeli.

W przypadku wymiany istniejącej wirówki należy podać aktualny model i szczegóły wirnika. Dzięki temu dostawca może porównać stare i proponowane konfiguracje, zamiast polecać maszynę wyłącznie na podstawie szybkości i wydajności.

Jeżeli zgodność jest niepewna, laboratoria mogą przesłać rysunki probówek, zdjęcia lub próbki fizyczne. Przed złożeniem zamówienia preferowane jest pisemne potwierdzenie kombinacji wirówki, rotora, kosza i adaptera.

 

Wniosek

Wybór wirówki do surowicy i osocza wymaga czegoś więcej niż tylko porównania prędkości obrotowej lub maksymalnej pojemności probówki. Projekt rurki z krwią, przebieg procesu krzepnięcia lub stosowania antykoagulantu, położenie wirnika, RCF, czas, hamowanie, przejrzystość warstwy i dzienną przepustowość należy rozpatrywać łącznie.

GlanLab zaleca przestrzeganie zatwierdzonych laboratoryjnych procedur operacyjnych i instrukcji producenta probówek na krew przed sfinalizowaniem konfiguracji wirówki. Aby omówić przebieg pracy z surowicą lub osoczem, skontaktuj się z nami  w sprawie specyfikacji lampy, preferencji rotora, wymaganego RCF i czasu, dziennej objętości i lokalnego napięcia.

 

Często zadawane pytania

Czy surowicę odwirowuje się przed czy po krzepnięciu?

Probówki z surowicą są zwykle wirowane po spełnieniu warunków krzepnięcia określonych w instrukcji probówki lub laboratoryjnych procedurach operacyjnych.

Czy osocze wymaga rurki z antykoagulantem?

Tak. Do przygotowania osocza wykorzystuje się rurkę z antykoagulantem określoną w procedurze laboratoryjnej.

Czy zawsze potrzebny jest wychylny rotor?

Nie. Wybór rotora powinien odbywać się zgodnie z instrukcjami dotyczącymi probówek i zatwierdzonymi SOP.

Czy surowica i osocze mogą używać tej samej wirówki?

Tak, jeśli rury, wirnik, RCF, czas i sterowanie hamowaniem obsługują oba procesy.

Czy laboratorium powinno używać RPM czy RCF?

RCF jest bardziej przydatny do porównywania różnych rozmiarów wirników, ale laboratoryjna SOP pozostaje ostatecznym odniesieniem.