Séparation sérum ou plasma : quels paramètres de centrifugeuse et quel type de rotor sont importants ?

Une centrifugeuse sérum ou plasma  doit être sélectionnée en fonction du tube de sang, de l'additif, de la conception du rotor, de la FCR et de la durée requises, ainsi que de la charge de travail quotidienne du laboratoire. Le sérum et le plasma proviennent tous deux d’échantillons de sang, mais les conditions avant centrifugation sont différentes. Les tubes à sérum nécessitent normalement la formation d'un caillot, tandis que les tubes à plasma contiennent un anticoagulant destiné à empêcher la coagulation.

GlanLab recommande de vérifier le flux de travail complet de préparation des échantillons avant de sélectionner l'équipement. Une centrifugeuse appropriée doit prendre en charge les tubes, adaptateurs, exigences de séparation et contrôles de fonctionnement exacts répertoriés dans les SOP du laboratoire. Cet article se concentre sur la configuration de la centrifugeuse et la séparation des couches d’échantillons, et non sur le diagnostic clinique ou sur un protocole médical universel.

1. Différences dans la préparation des échantillons de sérum et de plasma

Les échantillons de sérum nécessitent une étape de coagulation

Le sérum est préparé à partir de sang collecté dans un tube de sérum ordinaire, un tube activateur de caillot ou un tube séparateur de sérum. Avant la centrifugation, l'échantillon reste normalement intact jusqu'à ce que les conditions de coagulation spécifiées par le fabricant du tube ou les SOP du laboratoire soient atteintes.

Du point de vue de l'équipement, la centrifugeuse doit accepter le tube exact et fournir une force, un temps, une accélération et un freinage stables. La centrifugation avant la fin de l’étape requise de préparation de l’échantillon peut réduire la clarté de la séparation finale.

Les échantillons de plasma utilisent des tubes anticoagulants

Le plasma est préparé à partir de sang collecté dans un tube contenant un anticoagulant. Les systèmes de tubes courants peuvent utiliser des additifs à base d'EDTA, d'héparine ou de citrate, en fonction du flux de travail du laboratoire.

La centrifugeuse ne détermine pas le bon additif. Son rôle est de traiter le tube sélectionné dans les conditions indiquées dans la SOP approuvée. Les laboratoires comparant les équipements peuvent consulter un centrifugeuse de sang  après avoir confirmé le type d’échantillon et les exigences en matière de tubes.

Les dernières couches ne sont pas identiques

Après centrifugation, les tubes à sérum présentent normalement une couche liquide au-dessus du caillot ou de la barrière séparatrice. Les tubes à plasma retiennent une couche de liquide anticoagulé au-dessus du matériau cellulaire.

Une séparation nette ne dépend pas seulement de la vitesse maximale. La préparation du tube, la géométrie du rotor, le RCF, le temps et la décélération influencent tous la stabilité et la visibilité des couches après l'analyse.

2. Type de tube et considérations relatives aux additifs

Identifiez le tube sanguin exact

La couleur du tube à elle seule ne suffit pas pour la sélection de la centrifugeuse. Les laboratoires doivent enregistrer le fabricant, le numéro du produit, le volume nominal, le diamètre, la longueur totale, la hauteur du capuchon et la forme du fond.

Deux tubes ayant le même volume indiqué peuvent nécessiter des adaptateurs différents. L'un peut s'asseoir trop haut dans le rotor, tandis qu'un autre peut se déplacer à l'intérieur d'un support surdimensionné. Un support adéquat et un dégagement du couvercle doivent être confirmés avant une utilisation de routine.

Les additifs et les séparateurs affectent la correspondance des équipements

Les tubes de sérum ordinaire, les tubes activateurs de caillot, les tubes séparateurs de gel et les tubes anticoagulants peuvent être accompagnés d'instructions de centrifugation différentes. Les barrières de gel et les séparateurs mécaniques peuvent également avoir des exigences en matière de rotor ou de freinage.

Le laboratoire doit suivre les instructions du tube et ses SOP validées plutôt que d'appliquer un réglage à chaque tube de sang.

Les adaptateurs doivent prendre en charge le tube

Un tube inséré dans une ouverture du rotor ne confirme pas automatiquement la compatibilité. Le tube doit rester soutenu pendant l'accélération, le fonctionnement à pleine vitesse et la décélération.

Confirmez si des coussins en caoutchouc, des manchons, des seaux ou des adaptateurs dédiés sont requis. La sélection de l'adaptateur affecte également le nombre de tubes utilisables par cycle équilibré.

 

3. Pourquoi le type de rotor affecte la clarté des couches

Les rotors pivotants produisent une position horizontale du tube

Un rotor pivotant permet aux godets de se déplacer vers l'extérieur à mesure que la vitesse augmente. Pendant l’analyse, les tubes sanguins se rapprochent d’une position horizontale. Cela peut créer une interface de séparation plus plate et rendre la couche supérieure de sérum ou de plasma plus facile à observer dans de nombreux flux de travail de routine.

Cependant, un rotor pivotant n’est pas nécessaire pour chaque tube de sang. Le laboratoire doit suivre les instructions du fabricant du tube et les SOP approuvées.

Les rotors à angle fixe maintiennent les tubes à un angle constant

Un rotor à angle fixe maintient les tubes inclinés tout au long de la centrifugation. Le matériau séparé suit un chemin incliné, de sorte que l'interface finale peut apparaître plus inclinée que dans un godet horizontal.

Certains tubes sanguins permettent un traitement à angle fixe, mais le temps requis ou la méthode de freinage peuvent différer. Le Le guide du rotor à angle fixe ou pivotant  offre une comparaison plus large de la géométrie du rotor et des applications de routine.

Le freinage peut affecter l'interface finale

Un freinage brusque arrête rapidement le rotor et peut perturber les couches séparées ou une barrière de gel. Certains flux de travail permettent un freinage normal, tandis que d'autres nécessitent un freinage réduit ou une décélération plus longue.

Le frein ne doit pas être automatiquement désactivé. Son réglage doit suivre les instructions du tube de sang et les SOP du laboratoire.

 

4. RCF/Time doit suivre les SOP du laboratoire

RCF est plus utile que RPM seul

RPM décrit la vitesse du rotor. RCF décrit la force centrifuge générée à un rayon de rotor indiqué. Deux centrifugeuses fonctionnant au même régime peuvent appliquer des forces différentes à l'échantillon.

Lors du remplacement de l'équipement, les laboratoires doivent enregistrer le type de rotor existant, le rayon, la FCR, la durée et la méthode de freinage. Le transfert uniquement du RPM peut ne pas reproduire les mêmes conditions de fonctionnement.

Le GlanLab Le guide de centrifugeuse clinique  offre des informations supplémentaires sur la correspondance des échantillons cliniques, des tubes, de la capacité et des configurations du rotor.

Le temps dépend du tube et du rotor

Un temps de centrifugation développé pour un rotor pivotant ne doit pas être automatiquement transféré à un rotor à angle fixe. La conception du tube, la géométrie du rotor et l'objectif de séparation peuvent tous affecter la durée de fonctionnement approuvée.

Pour cette raison, cet article ne fournit pas de réglage fixe pour le sérum ou le plasma. Les instructions du tube, les exigences du test et les SOP du laboratoire restent les références finales.

L'accélération et la température peuvent également avoir de l'importance

Certains flux de travail spécifient une accélération, une décélération ou une température contrôlée. Une centrifugeuse doit fournir ces contrôles lorsqu'ils sont requis par le processus de laboratoire.

La réfrigération ne doit pas être choisie simplement parce qu’elle semble plus avancée. Le laboratoire doit confirmer si un contrôle de la température est nécessaire pour ses échantillons et ses procédures de test.

5. Planification des capacités pour le flux de travail quotidien

Calculer les tubes utilisables par analyse

La capacité maximale du rotor peut différer de la capacité pratique. Les dimensions des tubes, les adaptateurs, les positions d'équilibrage et les formats de tubes mixtes peuvent réduire le nombre de tubes traités en un seul cycle.

Un rotor annoncé comme ayant 24 positions ne peut pas contenir 24 des véritables tubes de sang du laboratoire. La capacité doit être confirmée avec la combinaison tube/adaptateur proposée.

Planifier la demande aux heures de pointe

Le volume quotidien moyen n'indique pas si la centrifugeuse peut gérer la période la plus chargée. Un laboratoire peut traiter tous les échantillons à la fin de la journée, mais subir tout de même des retards lorsque plusieurs lots arrivent ensemble.

Un calcul simple est :

Tubes de pointe par heure ÷ tubes utilisables par cycle = cycles minimum pendant l'heure la plus chargée

La durée totale du cycle doit inclure le chargement, l’accélération, la centrifugation, le freinage, le déchargement et le nettoyage.

Les tubes mixtes nécessitent un chargement flexible

Les laboratoires traitant plusieurs tailles de tubes de sérum et de plasma peuvent avoir besoin d'adaptateurs interchangeables ou de plusieurs jeux de seaux. Le personnel doit confirmer si différents formats de tubes peuvent être équilibrés et traités en toute sécurité dans le même rotor.

Un rotor plus grand n'est utile que lorsqu'il correspond au véritable mélange de tubes et permet un chargement simple.

 

6. Comment discuter des exigences avec le fournisseur

Avant de demander un équipement, préparez l’échantillon principal et les informations de fonctionnement dans un seul tableau.

Lors du remplacement d'une centrifugeuse existante, fournissez les détails du modèle et du rotor actuels. Cela permet au fournisseur de comparer les configurations anciennes et proposées plutôt que de recommander une machine uniquement en fonction de sa vitesse et de sa capacité.

Lorsque la compatibilité est incertaine, les laboratoires peuvent envoyer des dessins de tubes, des photographies ou des échantillons physiques. Une confirmation écrite de la combinaison centrifugeuse, rotor, godet et adaptateur est préférable avant de commander.

 

Conclusion

La sélection d’une centrifugeuse à sérum ou à plasma nécessite plus que la simple comparaison du régime ou de la capacité maximale du tube. La conception des tubes sanguins, le flux de travail de coagulation ou d'anticoagulant, la position du rotor, le RCF, le temps, le freinage, la clarté des couches et le débit quotidien doivent être pris en compte ensemble.

GlanLab recommande de suivre les SOP approuvées du laboratoire et les instructions du fabricant de tubes de sang avant de finaliser une configuration de centrifugeuse. Pour discuter de votre flux de travail sérum ou plasma, contactez-nous  avec les spécifications du tube, la préférence du rotor, le RCF et l'heure requis, le volume quotidien et la tension locale.

 

FAQ

Le sérum est-il centrifugé avant ou après la coagulation ?

Les tubes de sérum sont normalement centrifugés après les conditions de coagulation indiquées dans les instructions du tube ou dans les SOP du laboratoire.

Le plasma nécessite-t-il un tube anticoagulant ?

Oui. La préparation du plasma utilise le tube anticoagulant spécifié par le flux de travail du laboratoire.

Un rotor libre est-il toujours nécessaire ?

Non. La sélection du rotor doit suivre les instructions du tube de sang et les SOP approuvées.

Le sérum et le plasma peuvent-ils utiliser la même centrifugeuse ?

Oui, lorsque les commandes des tubes, du rotor, du RCF, du temps et du freinage prennent en charge les deux flux de travail.

Un laboratoire doit-il utiliser RPM ou RCF ?

Le RCF est plus utile pour comparer différentes tailles de rotor, mais les SOP du laboratoire restent la référence finale.