وجهات النظر: 0 المؤلف: محرر الموقع النشر الوقت: 2023-07-04 الأصل: موقع
تقدم هذه المقالة بشكل أساسي أنواعًا شائعة من تلوث الخلايا.
منطقة العمل:
هل تم إعداد غطاء التهوية لثقافة الخلية بشكل صحيح؟
هل هناك أي تدفقات هواء أو قنوات دخول مباشرة في المنطقة التي يوجد فيها غطاء التهوية ثقافة الخلية؟
هل منضدة العمل نظيفة؟
هل تم وضع العناصر المطلوبة للتجربة فقط على طاولة العمل؟
هل قمت بمسح طاولة العمل بنسبة 70 ٪ من الإيثانول قبل البدء في العمل؟
هل تقوم بانتظام بتنظيف وتطهير الحاضنة والثلاجة والفريزر ومعدات المختبر الأخرى؟
النظافة الشخصية:
هل غسلت يديك؟
هل ترتدي معدات الحماية الشخصية؟
إذا كان لديك شعر طويل ، هل هو مرتبط؟
هل تستخدم ماصة للتعامل مع السوائل؟
الكواشف ووسائل الإعلام الثقافية
هل قمت بتعقيم جميع الكواشف والوسائط والحلول التي أعدت في المختبر باستخدام الأساليب المناسبة؟
قبل وضع الحاويات ، وزجاجات الثقافة ، وألواح الثقافة ، وأطباق الثقافة على سطح العمل ، هل قمت بمسحها الخارجي بنسبة 70 ٪ من الإيثانول؟
هل قمت بتشديد أغطية زجاجات الكاشف ، وزجاجات الثقافة ، وغيرها من الحاويات عندما لا تكون قيد الاستخدام؟
هل تم وضع جميع لوحات الثقافة في أكياس معقمة محكمة الإغلاق؟
هل هناك أي علامات تلوث في الكواشف ، مثل الغيوم ، الجزيئات العائمة ، الروائح غير السارة ، أو الألوان غير الطبيعية؟ إذا كان الأمر كذلك ، هل قمت بتنظيفها أو التخلص منها؟
عملية:
هل تعمل ببطء وبعناية وتولي اهتمامًا للتقنيات المعقمة؟
هل قمت بمسح أسطح الأنابيب ، وزجاجات الكاشف ، وزجاجات الثقافة مع 70 ٪ من الإيثانول قبل وضعها في غطاء التهوية ثقافة الخلايا؟
هل وضعت الأغطية التي تواجه لأسفل في منطقة العمل؟
هل تستخدم ماصات زجاجية معقمة أو أنابيب بلاستيكية معقمة يمكن التخلص منها للتعامل مع السوائل؟
هل تستخدم ماصات معقمة مرة واحدة فقط لتجنب التلوث المتبادل؟
هل تجنبت لمس طرف ماصة إلى أي عناصر غير سريعة ، بما في ذلك الحافة الخارجية لخيوط رقبة الزجاجة؟
في حالة حدوث انسكابات سائلة ، هل امتصتها على الفور ومسحت المنطقة بنسبة 70 ٪ من الإيثانول؟
تجدر الإشارة إلى أنه يمكن بسهولة تجاهل وضع العناصر على مقاعد البدلاء النظيف الفائقة ، وكذلك النظافة الشخصية مثل الشعر الطويل. يمكن أن تسبب الكثير من العناصر الموجودة على مقعد النظيف الفائق تداخلًا لتدفق الهواء وضغط الهواء ، لذلك يحتاج الجميع إلى الانتباه.
'تعرف على نفسك وعدوك ، ولن يتم هزيمتك أبدًا في مائة معارك. ' معرفة كيفية منع التلوث ، نحتاج أيضًا إلى معرفة كيفية التعرف عليه. بعد كل شيء ، تحتاج الخلايا الملوثة إلى التخلص منها على الفور ، وإلا ، إذا جمعت الملوثات جميع الأحجار الكريمة ، فستكون ...
ينقسم تلوث ثقافة الخلايا بشكل أساسي إلى فئتين: الملوثات الكيميائية ، مثل الشوائب في وسائل الإعلام الثقافية والمصل والمياه والسموم الداخلية والملدنات والمنظفات ؛ والملوثات البيولوجية ، مثل البكتيريا ، الفطريات ، الخميرة ، الفيروسات ، الميكوبلازما ، والتلوث المتبادل لخطوط الخلايا الأخرى.
التلوث البكتيري:
تأتي البكتيريا بأشكال مختلفة ، مثل الكروية ، على شكل قضيب ، على شكل حلامة. تشكل البكتيريا والفطريات معًا الملوثات البيولوجية الأكثر شيوعًا في ثقافة الخلايا. عندما تكون الخلايا ملوثة بالبكتيريا ، يمكن اكتشافها غالبًا في غضون يوم أو يومين من خلال ملاحظة بسيطة مع العين المجردة ، وقد تنخفض قيمة الرقم الهيدروجيني لوسط الثقافة فجأة. تُظهر الصورة أدناه 293 خلية ملوثة بـ E. coli وتنمو كخلايا ملتصقة.
التلوث الفطري:
في المرحلة الأولية من التلوث الفطري ، يظل الرقم الهيدروجيني لوسط الثقافة مستقرًا ، ولكن مع تفاقم التلوث ، يزداد الرقم الهيدروجيني بسرعة ، مما تسبب في أن يصبح الوسط عكرًا. تحت المجهر ، غالبًا ما تظهر الواصلة كحزم رقيقة ، وأحيانًا ككلس كثيفة من الجراثيم. يمكن للجراثيم تحمل بيئات قاسية للغاية وغير مواتية أثناء السكون. لذلك ، عندما يحدث التلوث الفطري ، من الضروري تجاهل الخلايا على الفور لمنع التلوث على نطاق واسع في الحاضنة.
تلوث الخميرة:
على غرار التلوث البكتيري ، تصبح وسط الثقافة تعطيريًا عند تلوث الخميرة ، خاصة أثناء التلوث المتأخر. يتغير درجة الحموضة في وسط الثقافة قليلاً بعد التلوث مع الخميرة ، ويزيد فقط عندما يكون التلوث شديدًا. تحت المجهر ، تظهر الخميرة كجزيئات بيضاوية أو كروية فردية ، بعضها قد يرعى في خلايا الابنة. تُظهر الصورة أدناه 293 خلية ملوثة بالخميرة.
التلوث الفيروسي:
الفيروسات لها أحجام صغيرة للغاية ، مما يجعل من الصعب اكتشافها وإزالتها من الكواشف المستخدمة في ثقافة الخلية. نظرًا لأن معظم الفيروسات لديها متطلبات صارمة للغاية لمضيفيها ، فإنها عمومًا ليس لها آثار ضارة على ثقافات الخلايا من الأنواع المضيفة بخلافها. ومع ذلك ، فإن استخدام الثقافات الخلوية المصابة بالفيروسات يمكن أن يشكل تهديدات صحية خطيرة للمشغلين التجريبيين.
تلوث الميكوبلازما:
يعتبر Mycoplasma أصغر كائن تكرار ذاتي. نظرًا لحجمها الصغير للغاية ، فإن اكتشاف الفايكوبلازما أمر صعب للغاية ، وغالبًا ما لا توجد علامات واضحة للعدوى ما لم تكن الكثافة مرتفعة للغاية. يمكن أن تستمر بعض الميكوبلازما في الثقافات الخلوية دون التسبب في موت الخلايا ، ولكن يمكن أن تغير سلوك الخلايا والتمثيل الغذائي في نظام الثقافة. تشمل المظاهر المحتملة لعدوى الميكوبلازما المزمنة انخفاضًا في معدل تكاثر الخلايا ، وانخفاض في الكثافة النووية ، وتجميع الخلايا في ثقافة التعليق. الأساليب الأكثر فاعلية للكشف عن تلوث الفايكوبلازما هي تلطيخ مضان ، ELISA ، PCR ، المناعة ، تقنيات التنمية الذاتية للإشعاع ، أو تحديد الميكروبيولوجية لاختبار الثقافة بشكل دوري.
التلوث المتبادل:
على الرغم من أنه ليس شائعًا مثل التلوث الميكروبي ، إلا أن التلوث المتبادل على نطاق واسع بين العديد من خطوط الخلايا وخطوط الخلايا المتنامية بسرعة مثل خلايا هيلا يمثل مشكلة واضحة. إن الحصول على خطوط الخلايا من ضفاف الخلايا ذات السمعة الطيبة ، والتحقق بانتظام من خصائص خطوط الخلايا ، واستخدام تقنيات المعقمة الجيدة هي طرق تقليدية للمساعدة في تجنب التلوث المتبادل.
استخدام المضادات الحيوية:
لا ينبغي استخدام المضادات الحيوية بشكل روتيني في ثقافة الخلايا لأن الإفراط في استخدامها يمكن أن يعزز تطور السلالات المقاومة للمضادات الحيوية ، مما يؤدي إلى تلوث مستمر منخفض المستوى. بمجرد إزالة المضادات الحيوية ، يمكن أن يتطور هذا التلوث منخفض المستوى في النهاية إلى تلوث واسع النطاق ، ويمكن أن يستمر استخدام المضادات الحيوية أيضًا في إخفاء التهابات الميكوبلازما وأنواع أخرى من التلوث. لذلك ، لا يمكن استخدام المضادات الحيوية إلا كملاذ أخير ضد التلوث ويجب استخدامه فقط لفترة قصيرة من الزمن ، ويجب إزالته في أقرب وقت ممكن.