दृश्य: 0 लेखक: साइट संपादक प्रकाशित समय: 2023-07-04 मूल: साइट
यह लेख मुख्य रूप से सामान्य प्रकार के सेल संदूषण का परिचय देता है।
कार्य क्षेत्र:
क्या सेल संस्कृति के लिए वेंटिलेशन हुड सही ढंग से स्थापित है?
क्या उस क्षेत्र में कोई एयरफ्लो या प्रत्यक्ष प्रवेश चैनल हैं जहां सेल कल्चर वेंटिलेशन हुड स्थित है?
क्या वर्कबेंच साफ है?
क्या केवल प्रयोग के लिए आवश्यक वस्तुओं को कार्यक्षेत्र पर रखा गया है?
क्या आपने काम शुरू करने से पहले 70% इथेनॉल के साथ कार्यक्षेत्र को मिटा दिया है?
क्या आप नियमित रूप से इनक्यूबेटर, रेफ्रिजरेटर, फ्रीजर और अन्य प्रयोगशाला उपकरणों को साफ और कीटाणुरहित करते हैं?
व्यक्तिगत स्वच्छता:
क्या आपने अपने हाथ धोए हैं?
क्या आपने व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण पहने हैं?
यदि आपके पास लंबे बाल हैं, तो क्या यह वापस बंधा हुआ है?
क्या आप तरल पदार्थों को संभालने के लिए एक पिपेट का उपयोग कर रहे हैं?
अभिकर्मक और संस्कृति मीडिया
क्या आपने उपयुक्त तरीकों का उपयोग करके प्रयोगशाला में तैयार किए गए सभी अभिकर्मकों, मीडिया और समाधानों को निष्फल कर दिया है?
कंटेनरों, संस्कृति की बोतलें, संस्कृति प्लेट और काम की सतह पर संस्कृति व्यंजन रखने से पहले, क्या आपने 70% इथेनॉल के साथ उनके बाहरी लोगों को मिटा दिया है?
क्या आपने उपयोग में नहीं होने पर अभिकर्मक बोतलों, संस्कृति की बोतलों और अन्य कंटेनरों के ढक्कन को कस दिया है?
क्या सभी संस्कृति प्लेटों को बाँझ, एयरटाइट बैग में रखा गया है?
क्या अभिकर्मकों में संदूषण के कोई संकेत हैं, जैसे कि बादल, तैरने वाले कण, अप्रिय गंध, या असामान्य रंग? यदि हां, तो क्या आपने उन्हें साफ या त्याग दिया है?
संचालन:
क्या आप धीरे -धीरे, सावधानी से, और सड़न रोकनेवाला तकनीकों पर ध्यान दे रहे हैं?
क्या आपने सेल कल्चर वेंटिलेशन हुड में रखने से पहले 70% इथेनॉल के साथ पिपेट, अभिकर्मक बोतलों और संस्कृति की बोतलों की सतहों को मिटा दिया है?
क्या आपने कार्य क्षेत्र में नीचे की ओर का सामना कर रहे हैं?
क्या आप तरल पदार्थ को संभालने के लिए बाँझ ग्लास पिपेट या डिस्पोजेबल बाँझ प्लास्टिक पिपेट का उपयोग कर रहे हैं?
क्या आप क्रॉस-संदूषण से बचने के लिए केवल एक बार बाँझ पिपेट का उपयोग कर रहे हैं?
क्या आपने बॉटल नेक थ्रेड्स के बाहरी किनारे सहित किसी भी गैर-स्टेराइल आइटम को पिपेट की नोक को छूने से परहेज किया है?
यदि तरल फैल होता है, तो क्या आपने इसे तुरंत अवशोषित कर लिया है और 70% इथेनॉल के साथ क्षेत्र को मिटा दिया है?
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि सुपर क्लीन बेंच पर वस्तुओं की प्लेसमेंट और व्यवस्था, साथ ही साथ लंबे बालों के रूप में व्यक्तिगत स्वच्छता भी आसानी से अनदेखी की जाती है। सुपर क्लीन बेंच पर बहुत सारे आइटम वायु प्रवाह और हवा के दबाव में हस्तक्षेप कर सकते हैं, इसलिए सभी को ध्यान देने की आवश्यकता है।
'अपने आप को और अपने दुश्मन को जानें, और आप सौ लड़ाई में कभी भी पराजित नहीं होंगे। ' यह जानते हुए कि संदूषण को कैसे रोका जाए, हमें यह भी जानना होगा कि इसे कैसे पहचानना है। आखिरकार, दूषित कोशिकाओं को तुरंत छोड़ दिया जाना चाहिए, अन्यथा, यदि दूषित पदार्थ सभी रत्नों को इकट्ठा करते हैं, तो यह होगा ...
सेल संस्कृति संदूषण को मुख्य रूप से दो श्रेणियों में विभाजित किया गया है: रासायनिक संदूषक, जैसे कि संस्कृति मीडिया, सीरम, और पानी, एंडोटॉक्सिन, प्लास्टिसाइज़र और डिटर्जेंट में अशुद्धियां; और जैविक संदूषक, जैसे कि बैक्टीरिया, कवक, खमीर, वायरस, माइकोप्लाज्मा, और अन्य सेल लाइनों के क्रॉस-संदूषण।
विषाणु दूषण:
बैक्टीरिया विभिन्न आकृतियों में आते हैं, जैसे कि गोलाकार, रॉड के आकार और सर्पिल के आकार का। बैक्टीरिया और कवक एक साथ सेल संस्कृति में सबसे अधिक सामना किए जाने वाले जैविक संदूषक बनाते हैं। जब कोशिकाओं को बैक्टीरिया से दूषित किया जाता है, तो इसे अक्सर नग्न आंखों के साथ सरल अवलोकन द्वारा एक या दो दिनों के भीतर पता लगाया जा सकता है, और संस्कृति माध्यम का पीएच मूल्य अचानक कम हो सकता है। नीचे दी गई छवि ई। कोलाई के साथ दूषित 293 कोशिकाओं को दिखाती है और पालन कोशिकाओं के रूप में बढ़ती है।
फंगल संदूषण:
कवक संदूषण के प्रारंभिक चरण में, संस्कृति माध्यम का पीएच स्थिर रहता है, लेकिन जैसे -जैसे संदूषण बिगड़ता है, पीएच तेजी से बढ़ता है, जिससे माध्यम टर्बिड हो जाता है। माइक्रोस्कोप के तहत, हाइपहे अक्सर पतले बंडलों के रूप में दिखाई देते हैं, और कभी -कभी बीजाणुओं के घने समूहों के रूप में। बीजाणु डॉर्मेंसी के दौरान बेहद कठोर और प्रतिकूल वातावरण का सामना कर सकते हैं। इसलिए, जब कवक संदूषण होता है, तो इनक्यूबेटर में बड़े पैमाने पर संदूषण को रोकने के लिए कोशिकाओं को तुरंत त्यागना आवश्यक है।
खमीर संदूषण:
बैक्टीरियल संदूषण के समान, खमीर के साथ दूषित होने पर संस्कृति का माध्यम अशांत हो जाता है, विशेष रूप से देर से चरण संदूषण के दौरान। संस्कृति माध्यम का पीएच खमीर के साथ संदूषण के बाद बहुत कम बदलता है, और केवल तभी बढ़ जाता है जब संदूषण गंभीर होता है। माइक्रोस्कोप के तहत, खमीर व्यक्तिगत अंडाकार या गोलाकार कणों के रूप में दिखाई देता है, जिनमें से कुछ बेटी कोशिकाओं में कली हो सकते हैं। नीचे दी गई छवि 293 कोशिकाओं को खमीर से दूषित दिखाती है।
वायरल संदूषण:
वायरस में बहुत छोटे आकार होते हैं, जिससे सेल संस्कृति में उपयोग किए जाने वाले अभिकर्मकों से उन्हें पता लगाना और उन्हें हटाना मुश्किल हो जाता है। जैसा कि अधिकांश वायरस में अपने मेजबानों के लिए बहुत सख्त आवश्यकताएं होती हैं, वे आम तौर पर अपने स्वयं के अलावा मेजबान प्रजातियों से सेल संस्कृतियों पर प्रतिकूल प्रभाव नहीं डालते हैं। हालांकि, वायरस से संक्रमित सेल संस्कृतियों का उपयोग प्रयोगात्मक ऑपरेटरों को गंभीर स्वास्थ्य खतरे पैदा कर सकता है।
माइकोप्लाज्मा संदूषण:
माइकोप्लाज्मा को सबसे छोटा आत्म-प्रतिकृति जीव माना जाता है। इसके बेहद छोटे आकार के कारण, माइकोप्लाज्मा का पता लगाना बहुत मुश्किल है, और जब तक घनत्व बहुत अधिक न हो, तब तक संक्रमण के कोई स्पष्ट संकेत नहीं होते हैं। कुछ माइकोप्लाज्मा कोशिका संस्कृतियों में कोशिका मृत्यु के बिना भी बने रह सकते हैं, लेकिन वे संस्कृति प्रणाली में कोशिकाओं के व्यवहार और चयापचय को बदल सकते हैं। क्रोनिक माइकोप्लाज्मा संक्रमण की संभावित अभिव्यक्तियों में सेल प्रसार दर में कमी, परमाणु घनत्व में कमी और निलंबन संस्कृति में सेल एकत्रीकरण शामिल हैं। माइकोप्लाज्मा संदूषण का पता लगाने के लिए सबसे प्रभावी तरीके प्रतिदीप्ति धुंधला, एलिसा, पीसीआर, इम्यूनोस्टेनिंग, रेडियोग्राफिक आत्म-विकास, या माइक्रोबायोलॉजिकल निर्धारण तकनीक हैं जो समय-समय पर संस्कृति का परीक्षण करते हैं।
पार संदूषण:
हालांकि माइक्रोबियल संदूषण के रूप में आम नहीं है, कई सेल लाइनों के बीच व्यापक क्रॉस-संदूषण और तेजी से बढ़ती सेल लाइनों जैसे कि हेला कोशिकाएं एक स्पष्ट समस्या है। प्रतिष्ठित सेल बैंकों से सेल लाइनों को प्राप्त करना, नियमित रूप से सेल लाइनों के गुणों की जांच करना, और अच्छी सड़न रोकनेवाला तकनीकों का उपयोग करना पारंपरिक तरीके हैं जो क्रॉस-संदूषण से बचने में मदद करते हैं।
एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग:
एंटीबायोटिक दवाओं का नियमित रूप से सेल संस्कृति में उपयोग नहीं किया जाना चाहिए क्योंकि उनका अति प्रयोग एंटीबायोटिक-प्रतिरोधी उपभेदों के विकास को बढ़ावा दे सकता है, जिससे लगातार निम्न-स्तरीय संदूषण हो सकता है। एक बार एंटीबायोटिक दवाओं को हटा दिया जाता है, यह निम्न-स्तरीय संदूषण अंततः बड़े पैमाने पर संदूषण में विकसित हो सकता है, और एंटीबायोटिक दवाओं का निरंतर उपयोग माइकोप्लाज्मा संक्रमण और अन्य प्रकार के संदूषण को भी मुखौटा कर सकता है। इसलिए, एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग केवल संदूषण के खिलाफ अंतिम उपाय के रूप में किया जा सकता है और इसे केवल थोड़े समय के लिए उपयोग किया जाना चाहिए, और इसे जल्द से जल्द हटा दिया जाना चाहिए।
