نمایش ها: 0 نویسنده: ویرایشگر سایت زمان انتشار: 2023-08-08 مبدا: محل
01 تصور غلط 1: هرچه دانه های مغناطیسی تر باشد ، اثر استخراج بهتر می شود.
بسیاری از معلمان تمایل به افزایش مقدار دانه های مغناطیسی در هنگام اثر استخراج خوب ندارند ، فکر می کنند که دانه های مغناطیسی بیشتری قادر به جذب اسیدهای نوکلئیک بیشتری خواهند بود. با این حال ، باید گفت که این ایده مطلوب نیست.
ویژگی اصلی دانه های مغناطیسی این است که آنها می توانند هر دو در مایع پراکنده شوند و از فاز مایع به صورت جامد تحت عمل یک میدان مغناطیسی کاربردی جدا شوند ، هر سیستم معرف ، هر نوع دانه های مغناطیسی و مایع باید یک آستانه خاص باشد ، بیش از یک نسبت خاص ، بسیاری از مهره های مغناطیسی نیز نمی توانند به دلیل از دست دادن آن ، به طور مساوی در مورد مایعات پراکنده شوند ، اما به دلیل از بین رفتن آن به طور مساوی پراکنده می شوند ، اما به دلیل از بین رفتن آن به طور مساوی پراکنده می شوند ، اما به دلیل از بین رفتن آن به طور مساوی پراکنده می شوند ، اما به دلیل از بین رفتن آن به طور مساوی پراکنده می شوند ، اما به دلیل از بین رفتن آن ، به دلیل از بین رفتن از دست دادن آن ، می توانند به طور مساوی پراکنده شوند ، اما نمی توانند به طور مساوی در مایع پراکنده شوند ، اما به دلیل از بین رفتن آن ، از دست دادن آن به طور مساوی پراکنده می شوند ، اما به دلیل از دست دادن آن ، به دلیل از دست دادن آن به طور مساوی پراکنده می شوند. کارآیی دانه های اسید نوکلئیک و تماس با مایع.
و دانه های مغناطیسی بیش از حد نیز ناخالصی های بیشتری را جذب می کنند ، که تأثیر زیادی در تأثیر از بین بردن ناخالصی ها دارد. حتی مواقعی وجود دارد که بسیاری از دانه های مغناطیسی پروتئاز ، لیزوزیم و سایر اجزای عملکردی را که نقش عمده ای در سیستم مایع دارند ، جذب می کنند و منجر به ناکارآمدی کل کیت می شوند. مواقعی وجود دارد که اثر استخراج ضعیف است ، میزان دانه های مغناطیسی مورد استفاده را کاهش می دهد ، اما روش بهینه برای بهبود اثر استخراج است.
معمولاً ، دوز مهره مرجع داده شده توسط کیت روش مهره مغناطیسی کمی بیش از حد است ، بنابراین موارد زیادی وجود ندارد که برای بهبود راندمان جذب باید دوز مهره افزایش یابد. با این حال ، اگر مشخص شود که اثر استخراج به دلیل دوز کافی مهره ضعیف است ، می توان با افزایش دوز مهره در یک محدوده خاص ، اثر استخراج را بهبود بخشید.
02 تصور غلط 2: هرچه معرفهای بیشتری استفاده شود ، اثر استخراج بهتر می شود.
اثر لیز خوب نیست؟ راه حل لیز بیشتر اضافه کنید. اثر شستشو خوب نیست؟ راه حل شستشوی بیشتری را اضافه کنید. این تفکر عادت بسیاری از مشتریان در استفاده از کیت های معرف است.
با این حال ، برای روش مهره مغناطیسی ، هر افزایش در حجم مایع احتمال برخورد دانه های مغناطیسی را کاهش می دهد و کاهش احتمال برخورد دانه های مغناطیسی منجر به کاهش قابل توجهی در میزان جذب می شود. خیلی اوقات ، اگرچه افزایش محلول لیز و محلول شستشو می تواند در تقویت نقش لیز و شستشو نقش داشته باشد ، اما هسته روش مهره مغناطیسی استخراج ، کارآیی اثر دانه های مغناطیسی اسیدهای نوکلئیک است ، اما نمی تواند کارایی را به رشد می دهد که باعث افزایش کارایی در مورد بازده ساده نمی شود و باعث می شود که بازده SCTLEDENTINCE از بازده نوکلئیک تضمین کند ، می تواند از راندمان ناوچه ای تضمین کند. لزوماً کاملاً مؤثر نیست.
03 تصور غلط 3: هرچه بارها بیشتر شستشو دهید ، اثر استخراج بهتر می شود.
هنگامی که اسید نوکلئیک استخراج شده ناخالصی های زیادی دارد ، کاربر برای بدست آوردن اسید نوکلئیک خالص تر ، شستشوی زمان بیشتری را در نظر می گیرد. افزایش تعداد شستشو در واقع منجر به تصفیه اسیدهای نوکلئیک می شود ، اما با در نظر گرفتن اینکه هر شستشو مقدار مشخصی از اسیدهای نوکلئیک را از دست می دهد و احتمال هیدرولیز شکستگی اسید نوکلئیک را افزایش می دهد ، بنابراین به طور کلی صحبت کردن ، تعداد شستشو ها در 2 ~ 4 بار کنترل می شود.
04 تصور غلط 4: هرچه نمونه های بیشتری گرفته شود ، اثر استخراج بهتر می شود
در مورد نمونه به اندازه کافی تازه نیست یا میزان اسید نوکلئیک خود بسیار اندک است ، اغلب اثر استخراج اسید نوکلئیک خوب نیست ، بسیاری از معلمان از نمونه های بیشتری برای افزایش میزان استخراج اسید نوکلئیک استفاده می کنند.
با این حال ، به سادگی افزایش مقدار نمونه مورد نظر ، گاهی اوقات ناخالصی های فراتر از توانایی لیزات در لیز را معرفی می کند ، و همچنین باعث کاهش راندمان استخراج می شود ، بنابراین توصیه نمی شود با افزایش مقدار نمونه گرفته شده ، به هدف افزایش مقدار استخراج برسید.
اگر حجم استخراج به دلیل حجم نمونه کافی در واقع خیلی کم است ، توصیه می شود قبل از شروع استخراج ، یک مرحله غنی سازی یا غلظت را در پیش درمانی طی کنید. یا افزایش کامل بودن لیز برای افشای اسیدهای نوکلئیک بیشتر نیز یک راه حل است.
05 تصور غلط 5: اگر یک نوع مهره خوب است ، باید در تمام آزمایشات خوب کار کند
انواع مختلفی از دانه های مغناطیسی ، اندازه ذرات مختلف ، پراکندگی متفاوت ، زمان پاسخ مغناطیسی مختلف ، ماتریس پایه محصور سازی مختلف ، گروههای عملکردی اصلاح لایه بیرونی مختلف ، چگالی محصور کردن متفاوت ، طول بازوی گروه عملکردی متفاوت ، که منجر به طیف گسترده ای از خصوصیات مهره مغناطیسی می شود ، وجود دارد.
بنابراین ، دانه های مغناطیسی مختلف با آزمایش ها و سیستم های مختلف سازگار هستند. دقیقاً مانند همان معرفها برای استخراج اسید نوکلئیک دقیقاً همان فرمول نیستند ، همان دانه های مغناطیسی که برای استخراج اسید نوکلئیک اعمال می شود دقیقاً از نظر ماهیت یکسان نیستند.
برخی از دانه های مغناطیسی بازده جذب بالاتر در استخراج اسید ماکرونوکلئیک را نشان می دهند ، در حالی که برخی دیگر برای استخراج اسید نوکلئیک ردیابی مناسب تر هستند. برخی از دانه های مغناطیسی برای سری اسیدی سیستم های معرف مناسب هستند و برخی از دانه های مغناطیسی برای سری های قلیایی سیستم های معرف مناسب هستند. برخی از مهره های مغناطیسی پاسخ مغناطیسی خوبی دارند اما سرعت تسویه سریع ، که برای استخراج خودکار از نوع میله مغناطیسی مناسب تر است. برخی از مهره های مغناطیسی سرعت تسویه حساب آهسته اما زمان پاسخ مغناطیسی طولانی دارند که برای استخراج کننده اتوماتیک از نوع پیپت مناسب تر است.
به ندرت یک دانه مغناطیسی می تواند برای همه آزمایشات مناسب باشد ، علاوه بر کیت ثابت ، در بیشتر موارد ، دانه های مغناطیسی و سیستم های معرف باید با تنظیم زمان مشخصی انجام دهند.
06 تصور غلط 6: مقایسه با یک کیت خاص خوب نیست ، یعنی دانه های مغناطیسی خوب نیستند.
بسیاری از مشتریان در فرآیند غربالگری دانه های مغناطیسی در سیستم معرف در حال حاضر بالغ ، به سادگی مقدار مساوی از جایگزینی دانه های مغناطیسی ، برای مقایسه اثر دانه های مغناطیسی استفاده می شوند.
این به راحتی نتیجه می گیرد که یک مهره مغناطیسی خاص مؤثر نیست ، اما در واقع ، به دلیل دانه های مغناطیسی مختلف که برای سیستم های مختلف مناسب است و دوز متفاوت است ، اغلب برای به دست آوردن نتایج استخراج بهتر نیاز به تنظیم دارند.
