Zobrazení: 0 Autor: Editor stránek Publikování Čas: 2023-08-08 Původ: Místo
01 Mylná představa 1: Čím více magnetických kuliček, tím lepší je extrakční účinek.
Mnoho učitelů má tendenci zvyšovat množství magnetických kuliček, když není extrakční účinek dobrý, protože si myslí, že více magnetických korálků bude schopno absorbovat více nukleových kyselin. Je však třeba říci, že tato myšlenka není žádoucí.
Hlavním rysem magnetických kuliček je to, že mohou být dispergovány v kapalině a odděleny od kapalné fáze pevným způsobem pod působením aplikovaného magnetického pole, jakýkoli systém činidla, poměr magnetických kuliček a kapaliny by měl být určitý prahová , ale také by mohla být upravena, ale také by mohla být upravena, ale také by mohla být upravena, ale také by mohly být upraveny, ale také by mohly být upraveny, ale také by mohly být upraveny, ale také by mohly být upraveny, ale také by mohly být upraveny, ale také by se mohly ukládat, že by to bylo možné, aby se netvořilo, ale nelze by být u úpravy, ale také by se vytvořily. dostatečný ke zvýšení účinnosti kuliček nukleových kyselin a kontaktu kapaliny.
A nadměrné magnetické korálky také adsorbují více nečistot , což má velký vliv na účinek odstranění nečistot. Existují dokonce časy, kdy příliš mnoho magnetických kuliček bude adsorbovat proteázu, lysozym a další funkční komponenty, které hrají hlavní roli v kapalném systému, což vede k neefektivnosti celé soupravy. Existuje mnohokrát, když je extrakční účinek špatný, snižte množství použitých magnetických kuliček, ale je optimálním způsobem, jak zlepšit extrakční účinek.
Obvykle je dávka referenční korálky daná soupravou metody magnetického korálku mírně nadměrné , takže není mnoho případů, kdy je třeba zvýšit dávkování kuliček, aby se zlepšila účinnost adsorpce. Pokud je však stanoveno, že extrakční účinek je špatný kvůli nedostatečné dávkování kuliček, je možné zlepšit extrakční účinek zvýšením dávky kuliček v určitém rozmezí.
02 Mylná představa 2: Čím více použitých činidel, tím lepší je extrakční účinek.
Efekt lýzy není dobrý? Přidejte další řešení lýzy. Účinek mytí není dobrý? Přidejte další promývací roztok. Toto je obvyklé myšlení mnoha zákazníků při používání reagenčních souprav.
U metody magnetického korálku však každé zvýšení objemu kapaliny snižuje šanci na srážku magnetických kuliček a snížení šance na srážku magnetických kuliček povede k významnému snížení rychlosti adsorpce. So very often, although the increase in lysis solution and washing solution can indeed play a role in enhancing the role of lysis and washing, but the core of the magnetic bead method of extraction is the efficiency of the magnetic beads adsorption of nucleic acids, can not guarantee the efficiency of the magnetic beads collision efficiency can not guarantee the efficiency of nucleic acid extraction, so the simple increase in the use of reagents to improve the extraction effect is not necessarily completely efektivní.
03 Mylná představa 3: Čím vícekrát umýt, tím lepší je extrakční účinek.
Když má extrahovaná nukleová kyselina příliš mnoho nečistot, uživatel zvažuje vícekrát mytí, aby získal více čistě nukleové kyseliny. Zvyšování počtu promývání skutečně vede k čištění nukleových kyselin, ale s ohledem na to, že každé promytí ztratí určité množství nukleových kyselin a zvýší možnosti hydrolýzy zlomenin nukleové kyseliny, takže obecně řečeno, je počet promývání kontrolován ve 2 ~ 4krát je vhodný.
04 Mylná představa 4: Čím více vzorků odebraných, tím lepší je extrakční účinek
V případě vzorku není dostatečně čerstvý nebo samotný obsah nukleové kyseliny je velmi malý, často účinek extrakce nukleových kyselin není dobrý, mnoho učitelů použije více vzorků ke zvýšení množství extrakce nukleových kyselin.
Jednoduše zvýšení množství odebraného vzorku však někdy představí příliš mnoho nečistot nad schopnost lyzátu lyzovat a také sníží účinnost extrakce, takže se nedoporučuje dosáhnout cíle zvýšit množství extrakce jednoduše zvýšením množství odebraného vzorku.
Pokud je objem extrakce skutečně příliš nízký v důsledku nedostatečného objemu vzorku, doporučuje se projít krokem obohacení nebo koncentrace v předběžném ošetření před zahájením extrakce. Nebo zvýšení úplnosti lýzy k odhalení více nukleových kyselin je také roztokem.
05 Mylná představa 5: Pokud je jeden typ korálky dobrý, měl by to fungovat dobře ve všech experimentech
Existují různé typy magnetických kuliček, různé velikosti částic, odlišná rozptylovatelnost, různá doba magnetické odezvy, různá základna enkapsulace, různé funkční skupiny modifikace vnější vrstvy, různé hustoty ezací, různé délky funkčních skupin, což povede k širokému rozsahu magnetických charakteristik korálků.
Proto jsou různé magnetické kuličky přizpůsobeny různým experimentům a systémům. Stejně jako stejná činidla pro extrakci nukleových kyselin nejsou úplně stejný vzorec, stejné magnetické kuličky aplikované na extrakci nukleové kyseliny nejsou úplně stejné.
Některé magnetické kuličky vykazují vyšší adsorpční účinnost při extrakci makrokleové kyseliny, zatímco jiné jsou vhodnější pro extrakci stopové nukleové kyseliny. Některé magnetické kuličky jsou vhodné pro kyselé řady činidlových systémů a některé magnetické kuličky jsou vhodné pro alkalické řady činidlových systémů. Některé magnetické korálky mají dobrou magnetickou odezvu, ale rychlá rychlost usazování, která je vhodnější pro automatický extraktor typu magnetického typu; Některé magnetické korálky mají pomalou rychlost usazování, ale dlouhou dobu magnetického odezvy, která je vhodnější pro automatický extraktor typu pipety.
Zřídka magnetické kuličky mohou být vhodné pro všechny experimenty, kromě pevné soupravy, ve většině případů musí magnetické kuličky a činidlo musí s úpravou udělat určité množství času.
06 Myšlenka 6: Srovnání s určitou soupravou není dobré, to znamená, že magnetické korálky nejsou dobré.
Mnoho zákazníků v procesu screeningu magnetických kuliček v již zralém systému činidla, jednoduše stejné množství nahrazení magnetických kuliček, se používá k porovnání účinku magnetických kuliček.
To bude snadno dojít k závěru, že určitá magnetická kulička není účinná, ale ve skutečnosti je kvůli různým magnetickým kuličkám vhodným pro různé systémy a dávkování odlišné, často je třeba upravit, aby se dosáhlo lepších výsledků extrakce.
