Weergaven: 0 Auteur: Site Editor Publiceren Tijd: 2023-08-08 Oorsprong: Site
01 Misvatting 1: hoe meer magnetische kralen, hoe beter het extractie -effect.
Veel leraren hebben de neiging om de hoeveelheid magnetische kralen te vergroten wanneer het extractie -effect niet goed is, denkend dat meer magnetische kralen meer nucleïnezuren kunnen absorberen. Er moet echter worden gezegd dat dit idee niet wenselijk is.
Het belangrijkste kenmerk van magnetische kralen is dat ze zowel in vloeistof als gescheiden van de vloeibare fase op een solide manier kunnen worden gescheiden onder de werking van een toegepast magnetisch veld, elk reagenssysteem, de verhouding van magnetische kralen en vloeistof zou een bepaalde drempel moeten zijn , maar te veel magnetische beedingen kunnen niet voldoende zijn om de waspers te vergroten, maar ook het waspers van de waspers, maar ook Efficiëntie van de nucleïnezuurparels en het vloeibare contact.
En overmatige magnetische kralen zullen ook meer onzuiverheden adsorberen , die een grote invloed hebben op het effect van het verwijderen van onzuiverheden. Er zijn zelfs momenten waarop te veel magnetische kralen adsorb protease, lysozyme en andere functionele componenten die een belangrijke rol spelen in het vloeibare systeem spelen, wat leidt tot de inefficiëntie van de hele kit. Er zijn vele malen dat het extractie -effect slecht is, de hoeveelheid gebruikte magnetische kralen verminderen, maar is de optimale manier om het extractie -effect te verbeteren.
Gewoonlijk is de referentiebeldosering gegeven door de magnetische parelmethode kit enigszins overdreven , dus er zijn niet veel gevallen waarin de pareldosering moet worden verhoogd om de adsorptie -efficiëntie te verbeteren. Als echter wordt vastgesteld dat het extractie -effect slecht is vanwege onvoldoende pareldosering, is het mogelijk om het extractie -effect te verbeteren door de dosering van de parel binnen een bepaald bereik te verhogen.
02 Misvatting 2: hoe meer reagentia worden gebruikt, hoe beter het extractie -effect.
Het lysis -effect is niet goed? Voeg meer lysisoplossing toe. Het waseffect is niet goed? Voeg meer wasoplossing toe. Dit is het gebruikelijke denken van veel klanten bij het gebruik van reagenskits.
Voor de magnetische parelmethode vermindert elke toename van het volume van de vloeistof de kans op botsing van de magnetische kralen echter , en de vermindering van de kans op botsing van de magnetische kralen zal leiden tot een significante afname van de adsorptiesnelheid. Dus heel vaak, hoewel de toename van de lysisoplossing en de wasoplossing inderdaad een rol kan spelen bij het verbeteren van de rol van lysis en wassen, maar de kern van de magnetische kraalmethode van extractie is de efficiëntie van de magnetische kralenadsorptie van nucleïnezuren, kan de efficiëntie van het extractie -effect niet garanderen om de extractie te verbeteren noodzakelijkerwijs volledig effectief.
03 Misvatting 3: Hoe vaker je wast, hoe beter het extractie -effect.
Wanneer het geëxtraheerde nucleïnezuur te veel onzuiverheden heeft, zal de gebruiker overwegen vaker wassen te wassen om meer puur nucleïnezuur te krijgen. Het verhogen van het aantal wasbeurten is inderdaad bevorderlijk voor de zuivering van nucleïnezuren, maar rekening houdend met dat elke wasbeurt een bepaalde hoeveelheid nucleïnezuren verliest en de mogelijkheid van hydrolyse van nucleïnezuurfractuur vergroot, dus in het algemeen is het aantal wasbeurten geregeld in de 2 ~ 4 keer geschikt.
04 Misvatting 4: hoe meer monsters worden genomen, hoe beter het extractie -effect
In het geval van het monster is niet vers genoeg of is het nucleïnezuurgehalte zelf erg klein, vaak is het nucleïnezuur -extractie -effect niet goed, veel leraren zullen meer monsters gebruiken om de hoeveelheid nucleïnezuur -extractie te vergroten.
Het eenvoudigweg verhogen van de hoeveelheid genomen monsters zal echter soms te veel onzuiverheden introduceren buiten het vermogen van de lysaat om te lyseren, en zal ook de extractie -efficiëntie verminderen, dus het wordt niet aanbevolen om het doel te bereiken om de extractiebedrag te verhogen door eenvoudigweg de hoeveelheid genomen monster te vergroten.
Als het extractievolume inderdaad te laag is vanwege onvoldoende monstervolume, wordt het aanbevolen om een verrijking of concentratiestap in de voorbehandeling te doorlopen voordat de extractie wordt gestart. Of het vergroten van de volledigheid van de lysis om meer nucleïnezuren bloot te leggen, is ook een oplossing.
05 Misvatting 5: Als één type kraal goed is, zou het goed moeten werken in alle experimenten
Er zijn verschillende soorten magnetische kralen, verschillende deeltjesgrootte, verschillende dispergeerbaarheid, verschillende magnetische responstijd, verschillende inkapselingsbasematrix, verschillende buitenste laagmodificatie functionele groepen, verschillende inkapsulatiedichtheid, verschillende functionele groepsarmlengtes, die zullen leiden tot een breed scala van magnetische beadkarakteristieken.
Daarom zijn verschillende magnetische kralen aangepast aan verschillende experimenten en systemen. Net zoals dezelfde reagentia voor nucleïnezuurextractie niet precies dezelfde formule zijn, zijn dezelfde magnetische kralen die worden toegepast op nucleïnezuurextractie niet precies hetzelfde van aard.
Sommige magnetische kralen vertonen een hogere adsorptie -efficiëntie bij macronucleïnezuurextractie, terwijl andere meer geschikt zijn voor sporen nucleïnezuurextractie. Sommige magnetische kralen zijn geschikt voor zure reeks reagensystemen, en sommige magnetische kralen zijn geschikt voor alkalische reeks reagensystemen. Sommige magnetische kralen hebben een goede magnetische respons maar snelle bezinkingssnelheid, wat meer geschikt is voor automatische extractor van het magnetische staaftype; Sommige magnetische kralen hebben een langzame bezinkingssnelheid, maar lange magnetische responstijd, die meer geschikt is voor het automatische extractor van het pipettype.
Zelden kunnen een magnetische kralen geschikt zijn voor alle experimenten, naast de vaste kit met, in de meeste gevallen, magnetische kralen en reagensystemen een bepaalde hoeveelheid tijd met de aanpassing moeten doen.
06 Misvatting6: Vergelijking met een bepaalde kit is niet goed, dat wil zeggen dat de magnetische kralen niet goed zijn.
Veel klanten in het proces van het screenen van magnetische kralen in het reeds volwassen reagenssysteem, gewoon gelijke hoeveelheid vervanging van magnetische kralen, gebruikt om het effect van magnetische kralen te vergelijken.
Dit zal gemakkelijk concluderen dat een bepaalde magnetische kraal niet effectief is, maar in feite, vanwege de verschillende magnetische kralen die geschikt zijn voor verschillende systemen en de dosering anders is, moet vaak worden aangepast om betere extractieresultaten te verkrijgen.
