Görünümler: 0 Yazar: Site Editor Yayınlanma Zamanı: 2023-08-08 Köken: Alan
01 Yanlış Anlama 1: Ne kadar manyetik boncuklar, ekstraksiyon etkisi o kadar iyi olur.
Birçok öğretmen, ekstraksiyon etkisi iyi olmadığında manyetik boncuk miktarını artırma eğilimindedir, daha fazla manyetik boncukların daha fazla nükleik asit emebileceğini düşünür. Ancak, bu fikrin arzu edilmediği söylenmelidir.
Manyetik boncukların ana özelliği, hem sıvı içinde dağılabilmeleri hem de sıvı fazdan uygulanan bir manyetik alanın etkisi altında katı bir şekilde ayrılabilmeleri, belirli bir oranda belirli bir eşik, çok fazla manyetik boncuk, çok fazla manyetik boncuk, artışı, yeterince artışın , yeterince artışın, yeterince artışın, yeterince, yeterince, yeterince, yeterince, yeterince, yeterince, yeterince, yeterince, yeterince azınca, yeterince, yeterince azınca, yeterince azınca yeterince dağıtılamayacağını, ancak yeterince artışa sahip olmayacağıdır. Nükleik asit boncuklarının verimliliği ve sıvı temas.
Ve aşırı manyetik boncuklar daha fazla safsızlık adsorbe edecektir . , safsızlıkların kaldırılmasının etkisi üzerinde büyük etkisi olan Çok fazla manyetik boncukun proteaz, lizozim ve sıvı sisteminde önemli bir rol oynayan diğer fonksiyonel bileşenleri adsorbe edeceği ve tüm kitin verimsizliğine yol açacağı zamanlar bile vardır. Ekstraksiyon etkisinin zayıf olduğu birçok kez vardır, kullanılan manyetik boncuk miktarını azaltır, ancak ekstraksiyon etkisini iyileştirmenin en uygun yoludur.
Genellikle, manyetik boncuk yöntem kiti tarafından verilen referans boncuk dozu biraz aşırıdır , bu nedenle adsorpsiyon verimliliğini artırmak için boncuk dozajının artırılması gereken çok fazla durum yoktur. Bununla birlikte, yetersiz boncuk dozu nedeniyle ekstraksiyon etkisinin zayıf olduğu belirlenirse, belirli bir aralıktaki boncuk dozunu artırarak ekstraksiyon etkisini iyileştirmek mümkündür.
02 Yanlış Anlama 2: Ne kadar çok reaktif kullanılırsa, ekstraksiyon etkisi o kadar iyi olur.
Lizis etkisi iyi değil mi? Daha fazla liziz çözümü ekleyin. Yıkama etkisi iyi değil mi? Daha fazla yıkama çözümü ekleyin. Bu, birçok müşterinin reaktif kitlerinin kullanımında alışılmış düşüncesidir.
Bununla birlikte, manyetik boncuk yöntemi için, sıvının hacmindeki her artış manyetik boncukların çarpışma şansını azaltır ve manyetik boncukların çarpışma şansının azalması, adsorpsiyon oranında önemli bir azalmaya yol açacaktır. So very often, although the increase in lysis solution and washing solution can indeed play a role in enhancing the role of lysis and washing, but the core of the magnetic bead method of extraction is the efficiency of the magnetic beads adsorption of nucleic acids, can not guarantee the efficiency of the magnetic beads collision efficiency can not guarantee the efficiency of nucleic acid extraction, so the simple increase in the use of reagents to improve the extraction effect is not mutlaka tamamen etkili.
03 Yanlış Anlama 3: Ne kadar çok yıkarsanız, ekstraksiyon etkisi o kadar iyi olur.
Ekstrakte edilen nükleik asit çok fazla safsızlık olduğunda, kullanıcı daha saf nükleik asit elde etmek için daha fazla kez yıkamayı düşünecektir. Yıkama sayısının arttırılması gerçekten nükleik asitlerin saflaştırılmasına elverişlidir, ancak her bir yıkamanın belirli bir miktarda nükleik asit kaybedeceğini ve nükleik asit kırığının hidrolizini arttıracağını dikkate alarak, bu nedenle genel olarak, yıkama sayısı 2 ~ 4 kez kontrol edilir.
04 Yanlış Anlama 4: Ne kadar çok numune alınırsa, ekstraksiyon etkisi o kadar iyi olur
Numune yeterince taze değil veya nükleik asit içeriğinin kendisi çok küçük, genellikle nükleik asit ekstraksiyon etkisi iyi değil, birçok öğretmen nükleik asit ekstraksiyonu miktarını arttırmak için daha fazla örnek kullanacaktır.
Bununla birlikte, sadece alınan numune miktarını artırmak bazen lizatın lyse olma yeteneğinin ötesinde çok fazla safsızlık getirecektir ve ayrıca ekstraksiyon verimliliğini azaltacaktır, bu nedenle alınan numune miktarını artırarak ekstraksiyon miktarını artırma hedefine ulaşılması önerilmez.
Ekstraksiyon hacmi yetersiz numune hacmi nedeniyle gerçekten çok düşükse, ekstraksiyona başlamadan önce tedavi öncesi bir zenginleştirme veya konsantrasyon aşamasından geçmeniz önerilir. Veya daha fazla nükleik asit ortaya çıkarmak için lizisin bütünlüğünün arttırılması da bir çözümdür.
05 Yanlış Anlama 5: Bir tip boncuk iyi ise, tüm deneylerde iyi çalışmalıdır
Çeşitli manyetik boncuk tipleri, farklı parçacık boyutu, farklı dağılabilirlik, farklı manyetik tepki süresi, farklı kapsülleme baz matrisi, farklı dış tabaka modifikasyonu fonksiyonel gruplar, farklı kapsülleme yoğunluğu, farklı fonksiyonel grup kol uzunlukları vardır, bu da çok çeşitli manyetik boncuk karakteristiklerine yol açar.
Bu nedenle, farklı manyetik boncuklar farklı deneylere ve sistemlere uyarlanmıştır. Tıpkı nükleik asit ekstraksiyonu için aynı reaktiflerin tam olarak aynı formül olmadığı gibi, nükleik asit ekstraksiyonuna uygulanan aynı manyetik boncuklar doğada tam olarak aynı değildir.
Bazı manyetik boncuklar, makronükleik asit ekstraksiyonunda daha yüksek adsorpsiyon etkinliği gösterirken, diğerleri eser nükleik asit ekstraksiyonu için daha uygundur. Bazı manyetik boncuklar asidik reaktif sistemleri için uygundur ve bazı manyetik boncuklar alkalin reaktif sistemleri için uygundur. Bazı manyetik boncuklar iyi manyetik tepkiye sahiptir, ancak manyetik çubuk tipi otomatik ekstraktör için daha uygun olan hızlı yerleşim hızına sahiptir; Bazı manyetik boncuklar, pipet tipi otomatik ekstraktör için daha uygun olan yavaş yerleşim hızına sahiptir, ancak uzun manyetik tepki süresine sahiptir.
Nadiren bir manyetik boncuklar, çoğu durumda, manyetik boncuklar ve reaktif sistemlerinin sabit kitine ek olarak tüm deneyler için uygun olabilir.
06 Yanlış hesaplama6: Belirli bir kitle karşılaştırma iyi değildir, yani manyetik boncuklar iyi değildir.
Manyetik boncukların etkisini karşılaştırmak için kullanılan, zaten olgun reaktif sistemdeki manyetik boncukları tarama sürecindeki birçok müşteri, manyetik boncukların eşit miktarda değiştirilmesi.
Bu, belirli bir manyetik boncukun etkili olmadığı sonucuna varacaktır, ancak aslında, farklı sistemler ve dozaj için uygun farklı manyetik boncuklar nedeniyle farklı olduğu için, daha iyi ekstraksiyon sonuçları elde etmek için genellikle ayarlanması gerekir.
