Wyświetlenia: 0 Autor: Edytor witryny Publikuj Czas: 2023-08-08 Pochodzenie: Strona
01 Błędne przekonanie 1: Im bardziej magnetyczne koraliki, tym lepszy efekt ekstrakcji.
Wielu nauczycieli ma tendencję do zwiększania ilości koralików magnetycznych, gdy efekt ekstrakcji nie jest dobry, myśląc, że więcej magnetycznych perełek będzie w stanie wchłonąć więcej kwasów nukleinowych. Należy jednak powiedzieć, że ten pomysł nie jest pożądany.
Główną cechą perełek magnetycznych jest to, że można je zarówno zdjąć w cieczy, jak i oddzielone od fazy ciekłej w sposób stały pod działaniem przykładanego pola magnetycznego, jakikolwiek układ odczynnika, stosunek koralików magnetycznych i cieczy powinien być pewnym progiem , nad pewnym stosunkiem, zbyt wiele magnetycznych koralików nie będzie w stanie wyrównywać się, nie będzie mogła być progu, ale nie będzie mogła być ustalona, ale nie będzie mogła być progu, ale nie będzie mogła być wystarczającym, również nie będzie produkowania, również nie będzie produkowania procesu mydania do mycia. Zwiększ wydajność perełek kwasu nukleinowego i ciekłego styku.
Nadmierne kulki magnetyczne zaadsorują również więcej zanieczyszczeń , co ma duży wpływ na efekt usuwania zanieczyszczeń. Są nawet chwile, w których zbyt wiele magnetycznych koralików adsorbuje proteazę, lizozym i inne elementy funkcjonalne, które odgrywają główną rolę w układzie płynnym, co prowadzi do nieefektywności całego zestawu. Istnieje wiele razy, gdy efekt ekstrakcji jest słaby, zmniejsz ilość zastosowanych koralików magnetycznych, ale jest optymalnym sposobem na poprawę efektu ekstrakcji.
Zwykle dawkowanie koralików referencyjnych podawane przez zestaw metod magnetycznych jest nieco nadmierne , więc nie ma wielu przypadków, w których należy zwiększyć dawkę koralików, aby poprawić wydajność adsorpcji. Jeśli jednak ustalono, że efekt ekstrakcji jest słaby ze względu na niewystarczającą dawkę koralików, możliwe jest poprawa efektu ekstrakcji poprzez zwiększenie dawki koralików w określonym zakresie.
02 Misconception 2: Im więcej stosowanych odczynników, tym lepszy efekt ekstrakcji.
Efekt lizy nie jest dobry? Dodaj więcej roztworu lizy. Efekt mycia nie jest dobry? Dodaj więcej rozwiązania do mycia. Jest to zwykłe myślenie wielu klientów w zakresie korzystania z zestawów odczynników.
Jednak dla metody magnetycznej kulek każdy wzrost objętości cieczy zmniejsza ryzyko zderzenia perełek magnetycznych , a zmniejszenie ryzyka zderzenia perełek magnetycznych doprowadzi do znacznego spadku szybkości adsorpcji. Tak bardzo często, chociaż wzrost roztworu lizy i roztworu mycia może rzeczywiście odgrywać rolę w zwiększaniu roli lizy i mycia, ale rdzeń metody ekstrakcji magnetycznej kulki jest wydajność magnetycznych perełek adsorpcji kwasów nukleinowych, nie może zagwarantować wydajności efektywności magnetycznych perełek. koniecznie całkowicie skuteczne.
03 Misconception 3: Im więcej razy myjesz, tym lepszy efekt ekstrakcji.
Gdy wyodrębniony kwas nukleinowy ma zbyt wiele zanieczyszczeń, użytkownik rozważy pranie więcej razy, aby uzyskać bardziej czysty kwas nukleinowy. Zwiększenie liczby mycia rzeczywiście sprzyja oczyszczaniu kwasów nukleinowych, ale biorąc pod uwagę, że każde mycie straci pewną ilość kwasów nukleinowych i zwiększy możliwość hydrolizy złamania kwasu nukleinowego, więc ogólnie rzecz biorąc, liczba przemyków jest kontrolowana w 2 ~ 4 razy.
04 Błędne przekonanie 4: Im więcej próbek, tym lepszy efekt ekstrakcji
W przypadku próbki nie jest wystarczająco świeża lub sama zawartość kwasu nukleinowego jest bardzo mała, często efekt ekstrakcji kwasu nukleinowego nie jest dobry, wielu nauczycieli użyje większej liczby próbek w celu zwiększenia ilości ekstrakcji kwasu nukleinowego.
Jednak po prostu zwiększenie ilości pobranej próbki czasami wprowadzi zbyt wiele zanieczyszczeń poza zdolnością Lysate do lizowania, a także zmniejszy wydajność ekstrakcji, dlatego nie zaleca się osiągnięcia celu zwiększenia ilości ekstrakcji poprzez po prostu zwiększenie ilości pobranej próbki.
Jeśli objętość ekstrakcji jest rzeczywiście zbyt niska ze względu na niewystarczającą objętość próbki, zaleca się przejście przez etap wzbogacania lub stężenia w obróbce wstępnej przed rozpoczęciem ekstrakcji. Lub zwiększenie kompletności lizy w celu ujawnienia większej liczby kwasów nukleinowych jest również roztworem.
05 Błędne przekonanie 5: Jeśli jeden rodzaj koralików jest dobry, powinien działać dobrze we wszystkich eksperymentach
Istnieją różne rodzaje perełek magnetycznych, różne wielkość cząstek, różna dyspergowalność, różny czas reakcji magnetycznej, różna macierz zasad enkapsulacji, różne grupy funkcjonalne modyfikacji warstwy zewnętrznej, różne gęstość enkapsulacji, różne długości ramienia grupy funkcjonalnej, co doprowadzi do szerokiego zakresu charakterystyki magnetycznych perełek.
Dlatego różne kulki magnetyczne są dostosowywane do różnych eksperymentów i systemów. Podobnie jak te same odczynniki do ekstrakcji kwasu nukleinowego nie są dokładnie tym samym wzorem, te same kulki magnetyczne stosowane do ekstrakcji kwasu nukleinowego nie są dokładnie takie samo z natury.
Niektóre kulki magnetyczne wykazują wyższą wydajność adsorpcji w ekstrakcji kwasu makronukleinowego, podczas gdy inne są bardziej odpowiednie do ekstrakcji śladowej kwasu nukleinowego. Niektóre koraliki magnetyczne są odpowiednie do kwaśnych serii systemów odczynników, a niektóre kulki magnetyczne są odpowiednie do serii alkalicznych systemów odczynników. Niektóre koraliki magnetyczne mają dobrą reakcję magnetyczną, ale szybką prędkość osiadania, która jest bardziej odpowiednia dla automatycznego ekstraktora typu pręta magnetycznego; Niektóre koraliki magnetyczne mają powolną prędkość osiadania, ale długi czas reakcji magnetycznej, który jest bardziej odpowiedni dla automatycznego ekstraktora typu pipety.
Rzadko koraliki magnetyczne mogą być odpowiednie dla wszystkich eksperymentów, oprócz stałego zestawu z, w większości przypadków, magnetyczne koraliki i systemy odczynników muszą spędzić pewien czas z regulacją.
06 Misconception6: Porównanie z pewnym zestawem nie jest dobre, to znaczy, magnetyczne koraliki nie są dobre.
Wielu klientów w procesie badań magnetycznych koralików w już dojrzałym systemie odczynników, po prostu równa ilość wymiany koralików magnetycznych, stosowanych do porównania efektu koralików magnetycznych.
Z łatwością stwierdzi to, że pewna koralika magnetyczna nie jest skuteczna, ale w rzeczywistości ze względu na różne kulki magnetyczne odpowiednie dla różnych układów i dawki są różne, często należy je dostosować, aby uzyskać lepsze wyniki ekstrakcji.
