01 Missverständnis 1: Je mehr magnetische Perlen, desto besser der Extraktionseffekt.
Viele Lehrer neigen dazu, die Menge an magnetischen Perlen zu erhöhen, wenn der Extraktionseffekt nicht gut ist, und glauben, dass mehr magnetische Perlen mehr Nukleinsäuren aufnehmen können. Es muss jedoch gesagt werden, dass diese Idee nicht wünschenswert ist.
Das Hauptmerkmal von magnetischen Perlen besteht darin, dass sie sowohl in Flüssigkeit dispergiert als auch unter der Wirkung eines angelegten Magnetfeldes von der flüssigen Phase, das Verhältnis von magnetischen Perlen und Flüssigkeiten und Flüssigkeit, von einem bestimmten Schwellenwert sein , das ein bestimmtes Verhältnis erhöht, und das Verhältnis von magnetischen Perlen und Flüssigkeit erhöht. Die Effizienz der Nukleinsäurungsperlen und des flüssigen Kontakts.
Und übermäßige magnetische Perlen werden auch mehr Verunreinigungen adsorbieren , was einen großen Einfluss auf die Auswirkung der Entfernung von Verunreinigungen hat. Es gibt sogar Zeiten, in denen zu viele magnetische Perlen Protease, Lysozym und andere funktionelle Komponenten adsorbieren, die eine wichtige Rolle im Flüssigkeitssystem spielen, was zur Ineffizienz des gesamten Kits führt. Es gibt viele Male, wenn der Extraktionseffekt schlecht ist, die Menge der verwendeten magnetischen Perlen reduzieren, ist jedoch der optimale Weg, um den Extraktionseffekt zu verbessern.
Normalerweise ist die Referenzkügelchendosis, die durch das Magnetkügelchen -Methode -Kit angegeben ist, etwas übermäßig übermäßig , sodass nicht viele Fälle, in denen die Perlendosis erhöht werden muss, um die Adsorptionseffizienz zu verbessern. Wenn jedoch festgestellt wird, dass der Extraktionseffekt aufgrund einer unzureichenden Perlendosis schlecht ist, ist es möglich, den Extraktionseffekt zu verbessern, indem die Perlendosis innerhalb eines bestimmten Bereichs erhöht wird.
02 Missverständnis 2: Je mehr Reagenzien verwendet werden, desto besser der Extraktionseffekt.
Der Lyse -Effekt ist nicht gut? Fügen Sie mehr Lyse -Lösung hinzu. Die Waschung ist nicht gut? Fügen Sie mehr Waschlösung hinzu. Dies ist das gewohnheitsmäßige Denken vieler Kunden bei der Verwendung von Reagenzien.
Bei der Magnetkügelchen -Methode verringert jedoch jede Erhöhung des Volumens der Flüssigkeit die Wahrscheinlichkeit einer Kollision der magnetischen Perlen , und die Verringerung der Wahrscheinlichkeit einer Kollision der magnetischen Perlen führt zu einer signifikanten Abnahme der Adsorptionsrate. Sehr oft kann die Effizienz der Magnetorten -Adsorption der Nukleinsäure -Effizienz nicht garantieren, obwohl die Zunahme der Lyse -Lösung und Waschlösung tatsächlich eine Rolle bei der Verbesserung der Rolle von Lyse und des Waschens spielen kann, aber der Kern der Magnetkügelchen -Extraktionsmethode ist die Effizienz der Magnetkügelchen -Adsorption von Nukleinsäuren. notwendigerweise völlig effektiv.
03 Missverständnis 3: Je mehr Male Sie waschen, desto besser der Extraktionseffekt.
Wenn die extrahierte Nukleinsäure zu viele Verunreinigungen aufweist, wird der Benutzer mehrmals erwägen, um mehr reine Nukleinsäure zu erhalten. Die Erhöhung der Anzahl der Waschungen ist in der Tat der Reinigung von Nukleinsäuren förderlich. Unter Berücksichtigung, dass jede Wäsche eine bestimmte Menge an Nukleinsäuren verliert und die Möglichkeit einer Hydrolyse der Nukleinsäurebraktur erhöht. Im Allgemeinen ist die Anzahl der Wäsche in der 2 ~ 4 -fachen kontrolliert.
04 Missverständnis 4: Je mehr Proben entnommen wurden, desto besser der Extraktionseffekt
Im Fall der Probe ist nicht frisch genug oder der Nukleinsäurehalt selbst sehr klein, häufig ist der Nukleinsäureeffekt nicht gut. Viele Lehrer verwenden mehr Proben, um die Menge der Nukleinsäure -Extraktion zu erhöhen.
Durch einfaches Erhöhen der genommenen Stichprobe werden manchmal zu viele Verunreinigungen über die Lyse -Fähigkeit zur Lyse hinausgeführt und auch die Extraktionseffizienz verringert, sodass es nicht empfohlen wird, das Ziel zu erreichen, die Extraktionsmenge durch einfaches Erhöhen der Anzahl der aufgenommenen Stichproben zu erhöhen.
Wenn das Extraktionsvolumen aufgrund eines unzureichenden Probenvolumens tatsächlich zu niedrig ist, wird empfohlen, einen Anreicherung oder einen Konzentrationsschritt in der Vorbehandlung vor dem Start der Extraktion durchzuführen. Oder die Vollständigkeit der Lyse zur Freilegung mehr Nukleinsäuren ist ebenfalls eine Lösung.
05 Missverständnis 5: Wenn eine Perlenart gut ist, sollte es in allen Experimenten gut funktionieren
Es gibt verschiedene Arten von magnetischen Perlen, unterschiedliche Partikelgröße, unterschiedliche Dispergierbarkeit, unterschiedliche magnetische Reaktionszeit, unterschiedliche Einkapselungsbasismatrix, unterschiedliche Funktionsgruppen der äußeren Schichtmodifikation, unterschiedliche Einkapselungsdichte, unterschiedliche funktionelle Gruppenarmlängen, die zu einem weiten Bereich der magnetischen Perleneigenschaften führen.
Daher sind verschiedene magnetische Perlen an verschiedene Experimente und Systeme angepasst. Genauso wie dieselben Reagenzien für die Nukleinsäure -Extraktion sind nicht genau die gleiche Formel, sind dieselben magnetischen Perlen, die auf die Nukleinsäure -Extraktion angewendet werden, in der Natur nicht genau gleich.
Einige magnetische Perlen zeigen eine höhere Adsorptionseffizienz bei der Extraktion von Makronkleinsäure, während andere eher für die Nukleinsäurextraktion geeignet sind. Einige magnetische Perlen eignen sich für saure Reihe von Reagenzsystemen, und einige magnetische Perlen eignen sich für die alkalische Reihe von Reagenzsystemen. Einige magnetische Perlen haben eine gute magnetische Reaktion, aber eine schnelle Absetzgeschwindigkeit, die eher für den automatischen Extraktor des Magnetstangentyps geeignet ist. Einige magnetische Perlen haben eine langsame Absetzgeschwindigkeit, aber eine lange magnetische Reaktionszeit, die eher für den automatischen Extraktor des Pipetten Typ geeignet ist.
Selten können eine magnetische Perlen für alle Experimente geeignet sein, zusätzlich zum festen Kit müssen in den meisten Fällen magnetische Perlen und Reagenzien mit der Einstellung eine gewisse Zeit in Anspruch nehmen.
06 Missverständnis6: Der Vergleich mit einem bestimmten Kit ist nicht gut, das heißt, die magnetischen Perlen sind nicht gut.
Viele Kunden im Prozess des Screenings von Magnetkügelchen im bereits ausgereiften Reagenzersystem, einfach gleicher Ersatz von magnetischen Perlen, verwendet, um die Wirkung von magnetischen Perlen zu vergleichen.
Dies wird leicht zu dem Schluss kommen, dass eine bestimmte magnetische Perle nicht wirksam ist, aber tatsächlich müssen aufgrund der verschiedenen magnetischen Perlen, die für verschiedene Systeme und Dosierung geeignet sind, häufig angepasst werden, um bessere Extraktionsergebnisse zu erzielen.
