Visninger: 0 Forfatter: Nettsted redaktør Publiser tid: 2023-08-08 Opprinnelse: Nettsted
01 Misoppfatning 1: Jo mer magnetiske perler, jo bedre er ekstraksjonseffekten.
Mange lærere har en tendens til å øke mengden magnetiske perler når ekstraksjonseffekten ikke er god, og tenker at mer magnetiske perler vil kunne absorbere flere nukleinsyrer. Det må imidlertid sies at denne ideen ikke er ønskelig.
Hovedfunksjonen til magnetiske perler er at de begge kan spres i væske og separert fra væskefasen på en fast måte under virkningen av et påført magnetfelt, ethvert reagenssystem, forholdet mellom magnetiske perler og væske skal være en viss terskel , over et visst forhold, for mange magnetiske perler, ikke kan klare, men som ikke er en visning, men som ikke er en viss, men som ikke er en viss, men som ikke er en viss, men ikke kan være en viss, men som ikke er en viss, er det å være Øk effektiviteten til nukleinsyreperlene og væskekontakten.
Og overdreven magnetiske perler vil også adsorbere mer urenheter , noe som har stor innflytelse på effekten av å fjerne urenheter. Det er til og med tider hvor for mange magnetiske perler vil adsorbere protease, lysozym og andre funksjonelle komponenter som spiller en viktig rolle i væskesystemet, noe som fører til ineffektiviteten til hele settet. Det er mange ganger når ekstraksjonseffekten er dårlig, reduserer mengden magnetiske perler som brukes, men er den optimale måten å forbedre ekstraksjonseffekten.
Vanligvis er referanse perle -doseringen gitt av Magnetic Bead Method -settet litt overdreven , så det er ikke mange tilfeller der perle -doseringen må økes for å forbedre adsorpsjonseffektiviteten. Imidlertid, hvis det er bestemt at ekstraksjonseffekten er dårlig på grunn av utilstrekkelig perle -dosering, er det mulig å forbedre ekstraksjonseffekten ved å øke perledosen i et visst område.
02 Misoppfatning 2: Jo flere reagenser som er brukt, jo bedre er ekstraksjonseffekten.
Lysiseffekten er ikke bra? Legg til mer lysoppløsning. Vaskeeffekten er ikke bra? Tilsett mer vaskeløsning. Dette er den vanlige tankegangen til mange kunder i bruk av reagenssett.
For den magnetiske perlemetoden reduserer imidlertid hver økning i volumet av væsken sjansen for kollisjon av magnetiske perler , og reduksjonen av sjansen for kollisjon av magnetiske perler vil føre til en betydelig reduksjon i adsorpsjonshastigheten. Så veldig ofte, selv om økningen i lysoppløsningen og vaskeløsningen faktisk kan spille en rolle i å styrke rollen som lys og vasking, men kjernen i magnetisk perle -metoden for ekstraksjon er effektiviteten til magnetiske perler Adsorpsjon av nukleinsyrer, kan ikke garantere effektiviteten til å styrke den enkle; ikke nødvendigvis helt effektiv.
03 Misoppfatning 3: Jo flere ganger du vasker, jo bedre er ekstraksjonseffekten.
Når den ekstraherte nukleinsyren har for mange urenheter, vil brukeren vurdere å vaske flere ganger for å få mer ren nukleinsyre. Å øke antall vasker bidrar faktisk til rensing av nukleinsyrer, men under hensyntagen til at hver vask vil miste en viss mengde nukleinsyrer, og øke muligheten for hydrolyse av nukleinsyrebrudd, så generelt sett er antallet vasker kontrollert i 2 ~ 4 ganger er passende.
04 Misoppfatning 4: Jo flere prøver tatt, jo bedre er ekstraksjonseffekten
Når det gjelder prøven ikke er friskt nok, eller selve nukleinsyreinnholdet er veldig lite, ofte er nukleinsyreekstraksjonseffekten ikke god, mange lærere vil bruke flere prøver for å øke mengden nukleinsyreekstraksjon.
Bare å øke mengden prøve som er tatt vil noen ganger innføre for mange urenheter utover lysatets evne til å lyse, og vil også redusere ekstraksjonseffektiviteten, så det anbefales ikke å oppnå målet om å øke utvinningsmengden ved å bare øke mengden prøve som er tatt.
Hvis ekstraksjonsvolumet faktisk er for lavt på grunn av utilstrekkelig prøvevolum, anbefales det å gå gjennom et berikelses- eller konsentrasjonstrinn i forbehandlingen før du starter ekstraksjonen. Eller å øke lyseringens fullstendighet for å avsløre flere nukleinsyrer er også en løsning.
05 Misoppfatning 5: Hvis en type perle er god, skal den fungere bra i alle eksperimenter
Det er forskjellige typer magnetiske perler, forskjellig partikkelstørrelse, forskjellig dispergeribility, forskjellig magnetisk responstid, forskjellig innkapslingsbasematrise, forskjellige ytre lagmodifiseringsfunksjonsgrupper, forskjellige innkapslingstetthet, forskjellige funksjonelle gruppearmlengder, noe som vil føre til et bredt spekter av magnetiske perleegenskaper.
Derfor er forskjellige magnetiske perler tilpasset forskjellige eksperimenter og systemer. Akkurat som de samme reagensene for nukleinsyreekstraksjon er ikke akkurat den samme formelen, er de samme magnetiske perlene påført nukleinsyreekstraksjon ikke akkurat de samme.
Noen magnetiske perler viser høyere adsorpsjonseffektivitet i makronukleinsyreekstraksjon, mens andre er mer egnet for sporingsnukleinsyreekstraksjon. Noen magnetiske perler er egnet for sure serier med reagenssystemer, og noen magnetiske perler er egnet for alkaliske serier med reagenssystemer. Noen magnetiske perler har god magnetisk respons, men hurtig settingshastighet, noe som er mer egnet for magnetisk stangtype automatisk avtrekk; Noen magnetiske perler har langsom bosettingshastighet, men lang magnetisk responstid, noe som er mer egnet for automatisk avtrekking av pipettetype.
Sjelden kan en magnetiske perler være egnet for alle eksperimenter, i tillegg til det faste settet med, i de fleste tilfeller, må magnetiske perler og reagenssystemer gjøre en viss tid med justeringen.
06 Misoppfatning6: Sammenligning med et visst sett er ikke bra, det vil si at magnetiske perlene ikke er gode.
Mange kunder i prosessen med å screene magnetiske perler i det allerede modne reagenssystemet, ganske enkelt like mye erstatning av magnetiske perler, brukt for å sammenligne effekten av magnetiske perler.
Dette vil lett konkludere med at en viss magnetisk perle ikke er effektiv, men faktisk på grunn av de forskjellige magnetiske perlene som er egnet for forskjellige systemer og dosering er forskjellig, må ofte justeres for å oppnå bedre ekstraksjonsresultater.
