Zobraziť: 0 Autor: Editor stránok Publikovať Čas: 2023-08-08 Pôvod: Miesto
01 Miskoncepcia 1: Čím magnetickejšie guľôčky, tým lepší je extrakčný efekt.
Mnoho učiteľov má tendenciu zvyšovať množstvo magnetických guľôčok, keď extrakčný efekt nie je dobrý, mysliac si, že viac magnetických guľôčok bude schopných absorbovať viac nukleových kyselín. Je však potrebné povedať, že táto myšlienka nie je žiaduca.
Hlavnou črtou magnetických guľôčok je to, že môžu byť dispergované v tekutine a oddelené od kvapalnej fázy pevným spôsobom pri pôsobení aplikovaného magnetického poľa, akýkoľvek systém činidla, pomer magnetických guľôčok by mal byť určitým prahom , pri určitom pomere, príliš veľa magnetických guľôčok sa nebude môcť rovnomerne rozptýliť v tekutine. Účinnosť guľôčok nukleových kyselín a kvapalný kontakt.
A nadmerné magnetické guľôčky tiež adsorbujú väčšie nečistoty , čo má veľký vplyv na vplyv odstránenia nečistôt. Existujú dokonca aj časy, keď príliš veľa magnetických guľôčok adsorbuje proteázu, lyzozým a ďalšie funkčné komponenty, ktoré hrajú hlavnú úlohu v kvapalnom systéme, čo vedie k neefektívnosti celej súpravy. Mnohokrát, keď je extrakčný efekt zlý, znížte množstvo použitých magnetických guľôčok, ale je to optimálny spôsob, ako zlepšiť extrakčný efekt.
Zvyčajne je referenčná dávka guľôčok poskytnutá súpravou metódy magnetických guľôčok mierne nadmerná , takže nie je veľa prípadov, keď je potrebné zvýšiť dávku guľôčok, aby sa zlepšila účinnosť adsorpcie. Ak sa však zistí, že extrakčný účinok je zlý v dôsledku nedostatočnej dávky guľôčok, je možné zlepšiť extrakčný účinok zvýšením dávky guľôčok v určitom rozsahu.
02 Misconception 2: Čím viac reagencií sa použije, tým lepší je extrakčný účinok.
Efekt lýzy nie je dobrý? Pridajte viac lyzačného roztoku. Efekt pranie nie je dobrý? Pridajte ďalšie umývacie roztoky. Toto je obvyklé myslenie mnohých zákazníkov pri používaní súprav na činidlá.
Avšak pri metóde magnetických guľôčok však každé zvýšenie objemu kvapaliny znižuje pravdepodobnosť zrážky magnetických guľôčok a zníženie pravdepodobnosti zrážky magnetických guľôčok povedie k významnému zníženiu rýchlosti adsorpcie. Aj keď zvýšenie lýzového roztoku a roztoku premývania môže skutočne hrať úlohu pri zvyšovaní úlohy lýzy a pranie, ale jadro metódy extrakcie magnetických guľôčok je účinnosť magnetických guľôčok adsorpcie nukleových kyselín, nemôže zaručiť účinnosť extrakcie magnetických guľôčok. nevyhnutne úplne efektívne.
03 Misconception 3: Čím viac sa umyjete, tým lepší je extrakčný efekt.
Ak má extrahovaná nukleová kyselina príliš veľa nečistôt, používateľ zváži viackrát umývanie, aby získal čistejšiu nukleovú kyselinu. Zvýšenie počtu praní skutočne vedie k čisteniu nukleových kyselín, ale berúc do úvahy, že každé pranie stratí určité množstvo nukleových kyselín a zvýši možnosť hydrolýzy zlomenín nukleových kyselín, takže vo všeobecnosti je potrebné, aby sa počet preplachov riadil 2 ~ 4 krát.
04 Misconception 4: Čím viac vzoriek sa odobralo, tým lepší je extrakčný efekt
V prípade vzorky nie je dostatočne čerstvé alebo samotný obsah nukleovej kyseliny je veľmi malý, často extrakčný účinok nukleových kyselín nie je dobrý, mnohí učitelia použijú viac vzoriek na zvýšenie množstva extrakcie nukleových kyselín.
Jednoduchým zvýšením množstva odobratej vzorky však niekedy zavedie príliš veľa nečistôt nad rámec schopnosti lyzátu lýzu a tiež zníži účinnosť extrakcie, takže sa neodporúča dosiahnuť cieľ zvýšenia množstva extrakcie jednoduchým zvýšením množstva odobratej vzorky.
Ak je extrakčný objem skutočne príliš nízky v dôsledku nedostatočného objemu vzorky, odporúča sa pred začatím extrakcie prejsť krokom obohatenia alebo koncentrácie v predbežnom ošetrení. Alebo zvýšenie úplnosti lýzy na odhalenie viacerých nukleových kyselín je tiež roztokom.
05 Misconception 5: Ak je jeden typ korálikov dobrý, mal by fungovať dobre vo všetkých experimentoch
Existujú rôzne typy magnetických guľôčok, rôzna veľkosť častíc, rôzna dispergovateľnosť, rôzna doba magnetickej odozvy, rôzna matrica enkapsulačnej bázy, rôzne funkčné skupiny modifikácie vonkajšej vrstvy, rôzne hustoty enkapsulácie, rôzne dĺžky funkčných skupín ARM, čo povedie k širokému rozsahu charakteristík magnetických guľôčok.
Preto sú rôzne magnetické guľôčky prispôsobené rôznym experimentom a systémom. Rovnako ako tie isté činidlá pre extrakciu nukleových kyselín nie sú presne rovnakým vzorcom, rovnaké magnetické guľôčky aplikované na extrakciu nukleových kyselín nie sú v prírode úplne rovnaké.
Niektoré magnetické guľôčky vykazujú vyššiu adsorpčnú účinnosť v extrakcii kyseliny makronukleovej, zatiaľ čo iné sú vhodnejšie na extrakciu stopových nukleových kyselín. Niektoré magnetické guľôčky sú vhodné pre kyslé série systémov činidiel a niektoré magnetické guľôčky sú vhodné pre alkalické série reagentných systémov. Niektoré magnetické guľôčky majú dobrú magnetickú odozvu, ale rýchlu rýchlosť usadenia, ktorá je vhodnejšia pre automatický extraktor magnetického tyče; Niektoré magnetické guľôčky majú pomalú rýchlosť usadzovania, ale dlhú dobu magnetickej odozvy, ktorá je vhodnejšia pre automatický extraktor typu pipety.
Zriedkavo môžu byť magnetické guľôčky vhodné pre všetky experimenty, okrem pevnej súpravy s, vo väčšine prípadov magnetické guľôčky a systémy činidla musia urobiť určitý čas s úpravou.
06 Misconception6: Porovnanie s určitou súpravou nie je dobré, to znamená, že magnetické guľôčky nie sú dobré.
Mnoho zákazníkov v procese skríningu magnetických guľôčok v už zrelom systéme činidla, jednoducho rovnaké množstvo nahradenia magnetických guľôčok, ktoré sa používajú na porovnanie účinku magnetických guľôčok.
To ľahko dospeje k záveru, že určitá magnetická guľôčka nie je účinná, ale v skutočnosti je v dôsledku rôznych magnetických guľôčok vhodných pre rôzne systémy a dávkovanie odlišné, často je potrebné upraviť, aby sa dosiahli lepšie výsledky extrakcie.
