01 Mbroveception 1: più perline magnetiche, migliore è l'effetto di estrazione.
Molti insegnanti tendono ad aumentare la quantità di perle magnetiche quando l'effetto di estrazione non è buono, pensando che più perle magnetiche saranno in grado di assorbire più acidi nucleici. Tuttavia, va detto che questa idea non è desiderabile.
The main feature of magnetic beads is that they can be both dispersed in liquid and separated from the liquid phase in a solid manner under the action of an applied magnetic field, any reagent system, the ratio of magnetic beads and liquid should be a certain threshold , over a certain ratio, too many magnetic beads will not be able to evenly dispersed in the liquid because of the loss of its dispersion properties, but also make the washing process can not be sufficiente per aumentare l'efficienza delle perle di acido nucleico e del contatto liquido.
E le perle magnetiche eccessive assorbono anche più impurità , il che ha una grande influenza sull'effetto della rimozione delle impurità. Ci sono anche momenti in cui troppe perle magnetiche adsorbiteranno la proteasi, il lisozima e altri componenti funzionali che svolgono un ruolo importante nel sistema liquido, portando all'inefficienza dell'intero kit. Ci sono molte volte in cui l'effetto di estrazione è scarso, riduce la quantità di perle magnetiche utilizzate, ma è il modo ottimale per migliorare l'effetto di estrazione.
Di solito, il dosaggio di perline di riferimento fornito dal kit di metodo del tallone magnetico è leggermente eccessivo , quindi non ci sono molti casi in cui il dosaggio del tallone deve essere aumentato per migliorare l'efficienza di adsorbimento. Tuttavia, se si determina che l'effetto di estrazione è scarso a causa di un dosaggio di perline insufficiente, è possibile migliorare l'effetto di estrazione aumentando il dosaggio del tallone all'interno di un determinato intervallo.
02 Mbroveception 2: più reagenti usati, migliore è l'effetto di estrazione.
L'effetto di lisi non è buono? Aggiungi più soluzione di lisi. L'effetto di lavaggio non è buono? Aggiungi più soluzione di lavaggio. Questo è il pensiero abituale di molti clienti nell'uso dei kit di reagenti.
Tuttavia, per il metodo del tallone magnetico, ogni aumento del volume del liquido riduce la possibilità di collisione delle perle magnetiche e la riduzione della possibilità di collisione delle perle magnetiche porterà a una significativa riduzione del tasso di adsorbimento. Quindi molto spesso, sebbene l'aumento della soluzione di lisi e la soluzione di lavaggio possa effettivamente svolgere un ruolo nel miglioramento del ruolo della lisi e del lavaggio, ma il nucleo del metodo di estrazione del tallone magnetico è l'efficienza dell'efficienza delle perle magnetiche non può garantire l'efficienza della collisione del magnetico, non può garantire l'efficienza dell'excrio necessariamente completamente efficace.
03 Mbroveception 3: più volte si lavi, migliore è l'effetto di estrazione.
Quando l'acido nucleico estratto ha troppe impurità, l'utente prenderà in considerazione il lavaggio di più volte per ottenere più acido nucleico puro. L'aumento del numero di lavaggi è davvero favorevole alla purificazione degli acidi nucleici, ma tenendo conto del fatto che ogni lavaggio perderà una certa quantità di acidi nucleici e aumenterà la possibilità di idrolisi della frattura degli acidi nucleici, quindi in generale, il numero di lavaggi è controllato nei 2 ~ 4 volte.
04 Ideavenzione 4: più campioni prelevati, migliore è l'effetto di estrazione
Nel caso del campione non è abbastanza fresco o il contenuto di acido nucleico stesso è molto piccolo, spesso l'effetto di estrazione dell'acido nucleico non è buono, molti insegnanti useranno più campioni per aumentare la quantità di estrazione di acido nucleico.
Tuttavia, semplicemente aumentare la quantità di campione prelevata a volte introdurrà troppe impurità al di là della capacità del lisato di lisare e ridurrà anche l'efficienza di estrazione, quindi non si raccomanda di raggiungere l'obiettivo di aumentare la quantità di estrazione semplicemente aumentando la quantità di campione prelevata.
Se il volume di estrazione è effettivamente troppo basso a causa del volume del campione insufficiente, si consiglia di passare attraverso una fase di arricchimento o concentrazione nel pretrattamento prima di iniziare l'estrazione. O aumentare la completezza della lisi per esporre più acidi nucleici è anche una soluzione.
05 Manceception 5: se un tipo di perline è buono, dovrebbe funzionare bene in tutti gli esperimenti
Esistono vari tipi di perle magnetiche, diverse dimensioni delle particelle, diverse dispersibilità, diversi tempi di risposta magnetica, matrice di base di incapsulamento diverse, diversi gruppi funzionali di modifica dello strato esterno, diversa densità di incapsulamento, diverse lunghezze del braccio del gruppo funzionale, che porterà a una vasta gamma di caratteristiche di tallone magnetico.
Pertanto, diverse perle magnetiche sono adattate a diversi esperimenti e sistemi. Proprio come gli stessi reagenti per l'estrazione di acido nucleico non sono esattamente la stessa formula, le stesse perle magnetiche applicate all'estrazione dell'acido nucleico non sono esattamente la stessa natura.
Alcune perle magnetiche mostrano una maggiore efficienza di adsorbimento nell'estrazione dell'acido macronucleico, mentre altre sono più adatte per l'estrazione di acido nucleico in traccia. Alcune perle magnetiche sono adatte per una serie acida di sistemi di reagenti e alcune perle magnetiche sono adatte per una serie di sistemi di reagenti alcalini. Alcune perle magnetiche hanno una buona risposta magnetica ma una velocità di assestamento rapida, che è più adatta per l'estrattore automatico di tipo a bordo magnetico; Alcune perle magnetiche hanno una velocità di assestamento lenta ma un lungo tempo di risposta magnetica, che è più adatto per l'estrattore automatico di tipo pipetta.
Raramente una perle magnetiche può essere adatta a tutti gli esperimenti, oltre al kit fisso con, nella maggior parte dei casi, le perle magnetiche e i sistemi di reagenti devono fare un certo periodo di tempo con la regolazione.
06 Mignoro 6: il confronto con un determinato kit non è buono, cioè le perle magnetiche non sono buone.
Molti clienti nel processo di screening di perle magnetiche nel sistema di reagenti già mature, semplicemente uguale di sostituzione delle perle magnetiche, utilizzate per confrontare l'effetto delle perle magnetiche.
Ciò concluderà facilmente che un certo tallone magnetico non è efficace, ma in realtà, a causa delle diverse perle magnetiche adatte a diversi sistemi e il dosaggio è diverso, spesso è necessario regolare per ottenere risultati di estrazione migliori.
