01 Заблуда 1: Што је више магнетних перли, то је бољи ефекат екстракције.
Многи наставници имају тенденцију да повећају количину магнетних перли када ефекат екстракције није добар, мислећи да ће више магнетних перли моћи да апсорбује више нуклеинских киселина. Међутим, мора се рећи да ова идеја није пожељна.
Главна карактеристика магнетних перли је да се могу и дисперговати у течности и одвојити од течне фазе на чврст начин под дејством примењеног магнетног поља, било ког система реагенса, однос магнетних перли и течности треба да буде одређени праг , преко одређеног односа, превише магнетних куглица неће моћи да се равномерно распрши у течности, али такође и процес дисперзије не може да се изгуби у течности. повећати ефикасност куглица нуклеинске киселине и контакта са течношћу.
И прекомерне магнетне перле ће такође адсорбовати више нечистоћа , што има велики утицај на ефекат уклањања нечистоћа. Постоје чак и случајеви када ће превише магнетних перли адсорбовати протеазу, лизозим и друге функционалне компоненте које играју главну улогу у течном систему, што доводи до неефикасности целог комплета. Постоји много пута када је ефекат екстракције лош, смањите количину коришћених магнетних перли, али је оптималан начин да се побољша ефекат екстракције.
Обично је референтна доза куглица дата комплетом за методу магнетних перли мало претерана , тако да нема много случајева у којима је потребно повећати дозу куглица да би се побољшала ефикасност адсорпције. Међутим, ако се утврди да је ефекат екстракције лош због недовољне дозе зрна, могуће је побољшати ефекат екстракције повећањем дозе зрна у одређеном опсегу.
02 Заблуда 2: Што се више реагенаса користи, то је бољи ефекат екстракције.
Ефекат лизе није добар? Додајте још раствора за лизу. Ефекат прања није добар? Додајте још раствора за прање. Ово је уобичајено размишљање многих купаца у коришћењу комплета реагенса.
Међутим, за методу магнетних перли, свако повећање запремине течности смањује могућност судара магнетних перли , а смањење шансе за колизију магнетних перли ће довести до значајног смањења брзине адсорпције. Дакле, врло често, иако повећање раствора за лизу и раствора за прање заиста може играти улогу у побољшању улоге лизе и прања, али језгро методе екстракције магнетних куглица је ефикасност магнетних куглица, адсорпција нуклеинских киселина, не може гарантовати ефикасност колизије магнетних перли, ефикасност судара не може да гарантује ефикасност употребе екстракта киселине у поновном коришћењу језгра. ефекат екстракције није нужно потпуно ефикасан.
03 Заблуда 3: Што више пута перете, то је бољи ефекат екстракције.
Када екстрахована нуклеинска киселина има превише нечистоћа, корисник ће размотрити прање више пута да би добио више чисте нуклеинске киселине. Повећање броја испирања је заиста погодно за пречишћавање нуклеинских киселина, али имајући у виду да ће свако прање изгубити одређену количину нуклеинских киселина, и повећати могућност хидролизе лома нуклеинске киселине, тако да је уопштено говорећи, број испирања се контролише у 2 ~ 4 пута је прикладно.
04 Заблуда 4: Што је више узорака узето, то је бољи ефекат екстракције
У случају да узорак није довољно свеж или је сам садржај нуклеинске киселине веома мали, често ефекат екстракције нуклеинске киселине није добар, многи наставници ће користити више узорака да повећају количину екстракције нуклеинске киселине.
Међутим, једноставно повећање количине узетог узорка понекад ће унети превише нечистоћа изван способности лизата да лизира, а такође ће смањити ефикасност екстракције, тако да се не препоручује постизање циља повећања количине екстракције једноставним повећањем количине узетог узорка.
Ако је запремина екстракције заиста прениска због недовољне запремине узорка, препоручује се да се прође кроз корак обогаћивања или концентрације у претходном третману пре почетка екстракције. Или повећање комплетности лизе да би се изложило више нуклеинских киселина је такође решење.
05 Заблуда 5: Ако је једна врста перли добра, требало би да добро функционише у свим експериментима
Постоје различите врсте магнетних перли, различите величине честица, различите дисперзибилности, различитог времена магнетног одзива, различите матрице базе инкапсулације, различитих функционалних група за модификацију спољашњег слоја, различите густине инкапсулације, различитих дужина кракова функционалне групе, што ће довести до широког спектра карактеристика магнетних перли.
Стога су различите магнетне перле прилагођене различитим експериментима и системима. Баш као што исти реагенси за екстракцију нуклеинске киселине нису потпуно исте формуле, исте магнетне перле које се примењују на екстракцију нуклеинске киселине нису потпуно исте по природи.
Неке магнетне перле показују већу ефикасност адсорпције у екстракцији макронуклеинске киселине, док су друге погодније за екстракцију нуклеинске киселине у траговима. Неке магнетне перле су погодне за киселе серије реагенсних система, а неке магнетне перле су погодне за алкалне серије реагенсних система. Неке магнетне перле имају добар магнетни одзив, али брзу брзину таложења, што је погодније за аутоматски екстрактор типа магнетне шипке; неке магнетне перле имају спору брзину таложења, али дуго магнетно време одзива, што је погодније за аутоматски екстрактор типа пипете.
Ретко магнетне перле могу бити погодне за све експерименте, поред фиксног комплета са, у већини случајева, магнетне перле и системи реагенса морају да одраде одређено време са подешавањем.
06 Заблуда6: Поређење са одређеним комплетом није добро, односно магнетне перле нису добре.
Многи купци у процесу скрининга магнетних перли у већ зрелом систему реагенса, једноставно једнаку количину замене магнетних перли, користе за упоређивање ефеката магнетних перли.
Ово ће лако закључити да одређена магнетна перла није ефикасна, али у ствари, због различитих магнетних перли које су погодне за различите системе и различите дозе, често их је потребно прилагодити како би се добили бољи резултати екстракције.
