दृश्य: 0 लेखक: साइट संपादक प्रकाशित समय: 2023-08-08 मूल: साइट
01 गलतफहमी 1: अधिक चुंबकीय मोतियों, निष्कर्षण प्रभाव उतना ही बेहतर होगा।
कई शिक्षक चुंबकीय मोतियों की मात्रा को बढ़ाते हैं जब निष्कर्षण प्रभाव अच्छा नहीं होता है, यह सोचकर कि अधिक चुंबकीय मोतियों को अधिक न्यूक्लिक एसिड को अवशोषित करने में सक्षम होगा। हालांकि, यह कहा जाना चाहिए कि यह विचार वांछनीय नहीं है।
चुंबकीय मोतियों की मुख्य विशेषता यह है कि वे दोनों तरल में बिखरे हुए हो सकते हैं और एक लागू चुंबकीय क्षेत्र की कार्रवाई के तहत एक ठोस तरीके से तरल चरण से अलग हो सकते हैं, किसी भी अभिकर्मक प्रणाली, चुंबकीय मोतियों और तरल का अनुपात एक निश्चित सीमा पर एक निश्चित अनुपात में होना चाहिए, बहुत सारे चुंबकीय मोतियों को भी अपसेल करने के लिए काम करने में सक्षम नहीं होगा, लेकिन न्यूक्लिक एसिड मोतियों और तरल संपर्क।
और अत्यधिक चुंबकीय मोतियों को भी अधिक अशुद्धियों का पालन करना होगा , जो अशुद्धियों को दूर करने के प्रभाव पर बहुत प्रभाव डालता है। यहां तक कि ऐसे समय भी होते हैं जब बहुत सारे चुंबकीय मोतियों को प्रोटीज, लाइसोजाइम और अन्य कार्यात्मक घटक मिलेंगे जो तरल प्रणाली में एक प्रमुख भूमिका निभाते हैं, जिससे पूरे किट की अक्षमता होती है। कई बार जब निष्कर्षण प्रभाव खराब होता है, तो उपयोग किए जाने वाले चुंबकीय मोतियों की मात्रा को कम करें, लेकिन निष्कर्षण प्रभाव में सुधार करने का इष्टतम तरीका है।
आमतौर पर, मैग्नेटिक बीड विधि किट द्वारा दी गई संदर्भ मनका खुराक थोड़ी अधिक होती है , इसलिए कई मामले नहीं हैं जहां सोखने की दक्षता में सुधार के लिए मनका खुराक बढ़ाने की आवश्यकता होती है। हालांकि, यदि यह निर्धारित किया जाता है कि अपर्याप्त मनका खुराक के कारण निष्कर्षण प्रभाव खराब है, तो एक निश्चित सीमा के भीतर मनका खुराक बढ़ाकर निष्कर्षण प्रभाव में सुधार करना संभव है।
02 गलतफहमी 2: अधिक अभिकर्मकों का उपयोग किया जाता है, निष्कर्षण प्रभाव उतना ही बेहतर होता है।
Lysis प्रभाव अच्छा नहीं है? अधिक lysis समाधान जोड़ें। धोने का प्रभाव अच्छा नहीं है? अधिक धुलाई समाधान जोड़ें। यह अभिकर्मक किट के उपयोग में कई ग्राहकों की आदतन सोच है।
हालांकि, चुंबकीय मनका विधि के लिए, तरल की मात्रा में प्रत्येक वृद्धि से चुंबकीय मोतियों की टक्कर की संभावना कम हो जाती है , और चुंबकीय मोतियों की टक्कर की संभावना में कमी से सोखने की दर में उल्लेखनीय कमी आएगी। इसलिए बहुत बार, हालांकि Lysis समाधान और धोने के समाधान में वृद्धि वास्तव में lysis और धोने की भूमिका को बढ़ाने में एक भूमिका निभा सकती है, लेकिन निष्कर्षण की चुंबकीय मनका विधि का कोर न्यूक्लिक एसिड के चुंबकीय मोतियों के सोखना की दक्षता है, जो कि चुंबकीय मोतियों की दक्षता की दक्षता की गारंटी नहीं दे सकता है, जो कि पूरी तरह से प्रभावी नहीं हो सकता है।
03 गलतफहमी 3: जितना अधिक बार आप धोते हैं, उतना ही बेहतर निष्कर्षण प्रभाव होता है।
जब निकाले गए न्यूक्लिक एसिड में बहुत अधिक अशुद्धियां होती हैं, तो उपयोगकर्ता अधिक शुद्ध न्यूक्लिक एसिड प्राप्त करने के लिए अधिक बार धोने पर विचार करेगा। वॉश की संख्या में वृद्धि वास्तव में न्यूक्लिक एसिड की शुद्धि के लिए अनुकूल है, लेकिन यह ध्यान में रखते हुए कि प्रत्येक वॉश न्यूक्लिक एसिड की एक निश्चित मात्रा में खो देगा, और न्यूक्लिक एसिड फ्रैक्चर के हाइड्रोलिसिस की संभावना को बढ़ाएगा, इसलिए आम तौर पर, वाश की संख्या 2 ~ 4 बार में नियंत्रित होती है।
04 गलतफहमी 4: जितना अधिक नमूने लिए गए, निष्कर्षण प्रभाव उतना ही बेहतर होगा
नमूने के मामले में पर्याप्त ताजा नहीं है या न्यूक्लिक एसिड सामग्री स्वयं बहुत कम होती है, अक्सर न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण प्रभाव अच्छा नहीं होता है, कई शिक्षक न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की मात्रा को बढ़ाने के लिए अधिक नमूनों का उपयोग करेंगे।
हालांकि, बस लिए गए नमूने की मात्रा में वृद्धि कभी -कभी लिसेट की लाईस की क्षमता से परे बहुत अधिक अशुद्धियों का परिचय देगी, और निष्कर्षण दक्षता को भी कम करेगी, इसलिए यह केवल नमूने की मात्रा में वृद्धि करके निष्कर्षण राशि को बढ़ाने के लक्ष्य को प्राप्त करने की सिफारिश नहीं की जाती है।
यदि निष्कर्षण की मात्रा वास्तव में अपर्याप्त नमूना मात्रा के कारण बहुत कम है, तो निष्कर्षण शुरू करने से पहले पूर्व-उपचार में संवर्धन या एकाग्रता कदम से गुजरने की सिफारिश की जाती है। या अधिक न्यूक्लिक एसिड को उजागर करने के लिए lysis की पूर्णता में वृद्धि भी एक समाधान है।
05 गलतफहमी 5: यदि एक प्रकार का मनका अच्छा है, तो यह सभी प्रयोगों में अच्छी तरह से काम करना चाहिए
विभिन्न प्रकार के चुंबकीय मोतियों, अलग -अलग कण आकार, अलग -अलग फैलाव, अलग -अलग चुंबकीय प्रतिक्रिया समय, विभिन्न एनकैप्सुलेशन बेस मैट्रिक्स, विभिन्न बाहरी परत संशोधन कार्यात्मक समूह, विभिन्न एनकैप्सुलेशन घनत्व, विभिन्न कार्यात्मक समूह हाथ की लंबाई, जो चुंबकीय मनेड विशेषताओं की एक विस्तृत श्रृंखला को जन्म देगा।
इसलिए, विभिन्न चुंबकीय मोतियों को विभिन्न प्रयोगों और प्रणालियों के लिए अनुकूलित किया जाता है। न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण के लिए एक ही अभिकर्मकों की तरह बिल्कुल समान सूत्र नहीं हैं, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण पर लागू समान चुंबकीय मोतियों को प्रकृति में बिल्कुल समान नहीं है।
कुछ चुंबकीय मोतियाँ मैक्रोन्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण में उच्च सोखना दक्षता दिखाती हैं, जबकि अन्य न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण के लिए अधिक उपयुक्त हैं। कुछ चुंबकीय मोतियां अभिकर्मक प्रणालियों की अम्लीय श्रृंखला के लिए उपयुक्त हैं, और कुछ चुंबकीय मोतियाँ अभिकर्मक प्रणालियों की क्षारीय श्रृंखला के लिए उपयुक्त हैं। कुछ चुंबकीय मोतियों में अच्छी चुंबकीय प्रतिक्रिया होती है लेकिन तेजी से बसने की गति होती है, जो चुंबकीय रॉड प्रकार के स्वचालित चिमटा के लिए अधिक उपयुक्त है; कुछ चुंबकीय मोतियों में धीमी गति से निपटने की गति होती है, लेकिन लंबे चुंबकीय प्रतिक्रिया समय, जो पिपेट प्रकार के स्वचालित चिमटा के लिए अधिक उपयुक्त है।
शायद ही कभी एक चुंबकीय मोतियों को सभी प्रयोगों के लिए उपयुक्त हो सकता है, निश्चित किट के अलावा, ज्यादातर मामलों में, चुंबकीय मोतियों और अभिकर्मक प्रणालियों को समायोजन के साथ एक निश्चित समय देना पड़ता है।
06 गलतफहमी 6: एक निश्चित किट के साथ तुलना अच्छी नहीं है, अर्थात्, चुंबकीय मोतियों अच्छे नहीं हैं।
पहले से ही परिपक्व अभिकर्मक प्रणाली में चुंबकीय मोतियों की जांच करने की प्रक्रिया में कई ग्राहक, चुंबकीय मोतियों के प्रतिस्थापन की समान मात्रा में, चुंबकीय मोतियों के प्रभाव की तुलना करने के लिए उपयोग किए जाते हैं।
यह आसानी से निष्कर्ष निकालेगा कि एक निश्चित चुंबकीय मनका प्रभावी नहीं है, लेकिन वास्तव में, विभिन्न प्रणालियों के लिए उपयुक्त विभिन्न चुंबकीय मोतियों के कारण और खुराक अलग है, बेहतर निष्कर्षण परिणाम प्राप्त करने के लिए अक्सर समायोजित करने की आवश्यकता होती है।
