6磁気ビード法による核酸抽出の過程での一般的な誤解

01 誤解1：磁気ビーズが多いほど、抽出効果が向上します。

多くの教師は、抽出効果が良くないときに磁気ビーズの量を増やす傾向があり、より多くの磁気ビーズがより多くの核酸を吸収できると考えています。ただし、このアイデアは望ましくないと言わなければなりません。

磁気ビーズの主な特徴は、液体に分散し、印加磁場の作用、試薬システム、磁気ビーズ と液体の比率が一定のしきい値である必要があり、多すぎる磁気ビーズは、液体を和らげるために、液体を抑えられるようにするために、液体を抑えられるようにするために、液体を抑えられるようにするために、多数の磁気ビーズが一定の材料である必要があります。核酸ビーズの効率と液体接触。

また、 過剰な磁気ビーズは、より多くの不純物を吸収し、不純物を除去する効果に大きな影響を与えます。磁気ビーズが多すぎると、プロテアーゼ、リゾチーム、および液体システムで主要な役割を果たす他の機能的成分を吸着させ、キット全体の非効率性につながる場合もあります。抽出効果が不十分な場合、使用される磁気ビーズの量を減らしますが、抽出効果を改善する最適な方法です。

通常、 磁気ビード法キットによって与えられる参照ビーズ投与量はわずかに過度であるため、吸着効率を改善するためにビーズの投与量を増やす必要がある場合は多くありません。ただし、ビーズの投与量が不十分なため抽出効果が低いと判断された場合、特定の範囲内でビーズ投与量を増やすことで抽出効果を改善することができます。

02 誤解2：使用される試薬が多いほど、抽出効果が向上します。

溶解効果は良くありませんか？さらに溶解ソリューションを追加します。洗浄効果は良くありませんか？さらに洗濯ソリューションを追加します。これは、試薬キットの使用における多くの顧客の習慣的な思考です。

ただし、磁気ビーズ法の場合、 液体の体積をすべて増加させると、磁気ビーズの衝突の可能性が減り、磁気ビーズの衝突の可能性が減少すると、吸着速度が大幅に減少します。非常に頻繁に、溶解溶液と洗浄溶液の増加は溶解と洗浄の役割を強化するのに実際に役割を果たす可能性がありますが、磁気ビーズの抽出方法のコアは核酸の磁気ビーズ吸着の効率であり、磁気ビーズの衝突効率の効率を保証できないので、単純な酸化効果を促進する効率を保証することはできません。必然的に完全に効果的です。

03 誤解3：洗浄する回数が多いほど、抽出効果が良くなります。

抽出された核酸の不純物が多すぎると、ユーザーはより純粋な核酸を得るために、より多くの洗浄を検討します。洗浄の数を増やすことは確かに核酸の精製を助長しますが、各洗浄が一定量の核酸を失い、核酸骨折の加水分解の可能性を高めることを考慮して、一般的に言えば、2〜4回で洗浄の数が適切です。

04 誤解4：採取されたサンプルが多いほど、抽出効果が良くなります

サンプルの場合、十分に新鮮でない場合、または核酸含有量自体が非常に小さく、多くの場合、核酸抽出効果は良くないため、多くの教師はより多くのサンプルを使用して核酸抽出量を増やします。

ただし、採取されたサンプルの量を増やすだけで、ライセートの溶解能力を超えた不純物が多すぎる場合があり、抽出効率も低下するため、 採取したサンプルの量を増やすだけで抽出量を増やすという目標を達成することは推奨されません。

サンプル量が不十分なため、抽出量が実際に低すぎる場合、抽出を開始する前に、治療前の濃縮または濃度ステップを経ることをお勧めします。または、より多くの核酸を露出させるために溶解の完全性を高めることも解です。

05 誤解5：ビーズの1つのタイプが良い場合、それはすべての実験でうまく機能するはずです

さまざまな種類の磁気ビーズ、異なる粒子サイズ、異なる分散性、異なる磁気応答時間、異なるカプセル化ベースマトリックス、異なる外層層の修正官能基、異なるカプセル化密度、異なる官能基群の腕の長さがあります。

したがって、異なる磁気ビーズは、さまざまな実験とシステムに適合しています。核酸抽出のための同じ試薬が正確に同じではないように、核酸抽出に適用される同じ磁気ビーズは、本質的に正確に同じではありません。

一部の磁気ビーズは、核核酸抽出においてより高い吸着効率を示していますが、他のビーズは微量核酸抽出により適しています。一部の磁気ビーズは、酸性の試薬システムに適しており、一部の磁気ビーズは、アルカリ系シリーズの試薬システムに適しています。一部の磁気ビーズは良好な磁気応答を持っていますが、沈殿速度が高速であり、磁気ロッドタイプの自動抽出器により適しています。一部の磁気ビーズは沈降速度が遅いが、磁気応答時間が長いため、ピペットタイプの自動抽出器により適しています。

ほとんどの場合、磁気ビーズと試薬システムを備えた固定キットに加えて、すべての実験に適した磁気ビーズがすべての実験に適していることはめったにありません。

06 Misconception6：特定のキットとの比較は良くありません。つまり、磁気ビーズは良くありません。

すでに成熟した試薬システムの磁気ビーズをスクリーニングする過程で多くの顧客は、磁気ビーズの効果を比較するために使用される磁気ビーズの交換の単純な量です。

これは、特定の磁気ビーズは効果的ではないと簡単に結論付けますが、実際には、異なるシステムに適した異なる磁気ビーズと投与量は異なるため、より良い抽出結果を得るにはしばしば調整する必要があります。