01 Missuppfattning 1: Ju fler magnetiska pärlor, desto bättre blir extraktionseffekten.
Många lärare tenderar att öka mängden magnetiska pärlor när extraktionseffekten inte är bra, och tänker att fler magnetiska pärlor kommer att kunna absorbera mer nukleinsyror. Det måste dock sägas att denna idé inte är önskvärd.
Huvuddragen hos magnetiska pärlor är att de både kan dispergeras i vätska och separeras från vätskefasen på ett fast sätt under inverkan av ett applicerat magnetfält, vilket reagenssystem som helst, förhållandet mellan magnetiska pärlor och vätska bör vara ett visst tröskelvärde , över ett visst förhållande kommer för många magnetiska pärlor inte att kunna spridas jämnt i vätskan på grund av förlusten av dess spridningsegenskaper, men kan inte öka effektiviteten för att öka effektiviteten. nukleinsyrapärlorna och vätskekontakten.
Och överdrivna magnetiska pärlor kommer också att adsorbera fler föroreningar , vilket har stor inverkan på effekten av att ta bort föroreningar. Det finns till och med tillfällen då för många magnetiska pärlor kommer att adsorbera proteas, lysozym och andra funktionella komponenter som spelar en stor roll i vätskesystemet, vilket leder till ineffektivitet i hela kitet. Det finns många gånger när extraktionseffekten är dålig, minska mängden magnetiska pärlor som används, men är det optimala sättet att förbättra extraktionseffekten.
Vanligtvis är referenspärldosen som ges av den magnetiska pärlmetoden något överdriven , så det finns inte många fall där pärldosen behöver ökas för att förbättra adsorptionseffektiviteten. Om det emellertid fastställs att extraktionseffekten är dålig på grund av otillräcklig pärldosering, är det möjligt att förbättra extraktionseffekten genom att öka pärldoseringen inom ett visst intervall.
02 Missuppfattning 2: Ju fler reagenser som används, desto bättre blir extraktionseffekten.
Lyseffekten är inte bra? Tillsätt mer lyslösning. Tvätteffekten är inte bra? Tillsätt mer tvättlösning. Detta är det vanliga tänkandet hos många kunder när de använder reagenskit.
För den magnetiska pärlmetoden minskar dock varje ökning av vätskans volym risken för kollision av de magnetiska pärlorna , och minskningen av risken för kollision av de magnetiska pärlorna kommer att leda till en signifikant minskning av adsorptionshastigheten. Så mycket ofta, även om ökningen av lyslösning och tvättlösning verkligen kan spela en roll för att förstärka rollen av lys och tvättning, men kärnan i den magnetiska pärlmetoden för extraktion är effektiviteten hos de magnetiska pärlornas adsorption av nukleinsyror, kan inte garantera effektiviteten hos de magnetiska pärlorna. inte nödvändigtvis helt effektivt.
03 Missuppfattning 3: Ju fler gånger du tvättar, desto bättre blir extraktionseffekten.
När den extraherade nukleinsyran har för många föroreningar kommer användaren att överväga att tvätta fler gånger för att få mer ren nukleinsyra. Att öka antalet tvättar är verkligen gynnsamt för rening av nukleinsyror, men med hänsyn till att varje tvätt kommer att förlora en viss mängd nukleinsyror och öka möjligheten för hydrolys av nukleinsyrafraktur, så generellt sett är antalet tvättar kontrollerat i 2 ~ 4 gånger lämpligt.
04 Missuppfattning 4: Ju fler prover som tas, desto bättre blir extraktionseffekten
I fallet med provet inte är tillräckligt färskt eller själva nukleinsyrainnehållet är mycket litet, ofta är nukleinsyraextraktionseffekten inte bra, många lärare kommer att använda fler prover för att öka mängden nukleinsyraextraktion.
Men att bara öka mängden prov som tas kommer ibland att introducera för många föroreningar utöver lysatets förmåga att lysera, och kommer också att minska extraktionseffektiviteten, så det rekommenderas inte att uppnå målet att öka extraktionsmängden genom att helt enkelt öka mängden prov som tas.
Om extraktionsvolymen verkligen är för låg på grund av otillräcklig provvolym, rekommenderas att gå igenom ett anriknings- eller koncentreringssteg i förbehandlingen innan extraktionen påbörjas. Eller att öka fullständigheten av lysen för att exponera fler nukleinsyror är också en lösning.
05 Missuppfattning 5: Om en typ av pärla är bra bör den fungera bra i alla experiment
Det finns olika typer av magnetiska pärlor, olika partikelstorlek, olika spridningsförmåga, olika magnetisk svarstid, olika inkapslingsbasmatris, olika funktionella grupper för modifiering av yttre skikt, olika inkapslingsdensitet, olika funktionella grupparmlängder, vilket kommer att leda till ett brett spektrum av magnetiska pärlegenskaper.
Därför är olika magnetiska pärlor anpassade till olika experiment och system. Precis som att samma reagens för nukleinsyraextraktion inte är exakt samma formel, är samma magnetiska pärlor som appliceras på nukleinsyraextraktion inte exakt samma till sin natur.
Vissa magnetiska pärlor visar högre adsorptionseffektivitet vid makronukleinsyraextraktion, medan andra är mer lämpade för spårnukleinsyraextraktion. Vissa magnetiska pärlor är lämpliga för sura serier av reagenssystem, och vissa magnetiska pärlor är lämpliga för alkaliska serier av reagenssystem. Vissa magnetiska pärlor har bra magnetisk respons men snabb sättningshastighet, vilket är mer lämpligt för automatisk extraktor av magnetisk stavtyp; vissa magnetiska pärlor har långsam sedimenteringshastighet men lång magnetisk svarstid, vilket är mer lämpligt för automatisk extraktor av pipetttyp.
Sällan en magnetisk pärla kan vara lämplig för alla experiment, förutom det fasta kitet med, i de flesta fall, magnetiska pärlor och reagenssystem måste göra en viss tid med justeringen.
06 Missuppfattning6: Jämförelse med ett visst kit är inte bra, det vill säga de magnetiska pärlorna är inte bra.
Många kunder i färd med att screena magnetiska pärlor i det redan mogna reagenssystemet, helt enkelt lika mängd ersättning av magnetiska pärlor, används för att jämföra effekten av magnetiska pärlor.
Detta kommer lätt att dra slutsatsen att en viss magnetisk pärla inte är effektiv, men i själva verket, på grund av de olika magnetiska pärlorna som är lämpliga för olika system och doseringen är olika, måste de ofta justeras för att få bättre extraktionsresultat.
